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菌P 酶切 已有1人参与
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菌P成功，且条带都非常好，可酶切不成功 条带不对，如图第一张是菌P的图 第二张是提质粒后酶切跑胶图，质粒大小9600多 连接片段400多 ，是小片段酶切看不清楚么，或是酶切条件有问题，还是连接不成功？  发自小木虫Android客户端 |
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-13 21:23:04
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-13 21:23:04
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建议加大质粒的量尝试。近期也在做载体构建，我要连接的目的基因片段也是400多bp。第一次酶切后目的条带特别浅，然后分别加大质粒的量至二倍、三倍，三倍时得到了较理想的亮条带。顺便提一句，我提取的质粒浓度在300ng/ul左右，酶切反应体系为20ul，酶切过夜。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-06-13 15:54:43
2楼2016-06-08 21:35:30
3楼2016-06-08 21:36:21
黄小萌萌
银虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
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- 性别: MM
- 专业: 肿瘤化学药物治疗
4楼2016-06-09 22:34:35
5楼2016-06-13 14:53:06
contactljh
银虫 (小有名气)
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- 注册: 2006-06-10
- 性别: GG
- 专业: 天然药物化学
6楼2016-06-13 15:31:54
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我的双酶切酶 一个是快酶（切20分钟）一个是慢酶（要切1-16小时） 我把两个加一起 20ul体系 切了大概两个半小时， 只加了快切酶的Buffer 请问这样切可以么？ 发自小木虫Android客户端 |
8楼2016-06-13 23:27:53
9楼2016-06-13 23:28:18
10楼2016-06-13 23:29:20