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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

楼主,求赠送pET30载体,跪谢!

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51楼2016-06-05 22:16:11
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
50楼: Originally posted by CarolChan at 2016-06-05 20:46:43
我和楼主遇到了一样的问题,一个936bp也就是35kD左右的片段,不管是和pET28a还是pMAL-C2X载体连接,宿主菌也换过BL21(DE3)、TB1和Transetta,怎样都是不表达。也做过诱导条件优化,改变诱导时间、温度和IPTG浓度,但 ...

求赠送载体!跪谢

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52楼2016-06-05 22:17:03
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prthefu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
50楼: Originally posted by CarolChan at 2016-06-05 20:46:43
我和楼主遇到了一样的问题,一个936bp也就是35kD左右的片段,不管是和pET28a还是pMAL-C2X载体连接,宿主菌也换过BL21(DE3)、TB1和Transetta,怎样都是不表达。也做过诱导条件优化,改变诱导时间、温度和IPTG浓度,但 ...

你好,我想请问一下,你们实验室还有pMAL-C2x载体吗?我能不能借一点呢。
nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
53楼2016-06-08 11:16:03
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CarolChan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
53楼: Originally posted by prthefu at 2016-06-08 11:16:03
你好,我想请问一下,你们实验室还有pMAL-C2x载体吗?我能不能借一点呢。...

我现在用的这个C2X载体是我从其他人构建好的重组质粒上切下来的,完整的C2X载体我这也没有了,抱歉
54楼2016-06-08 11:33:29
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prthefu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
54楼: Originally posted by CarolChan at 2016-06-08 11:33:29
我现在用的这个C2X载体是我从其他人构建好的重组质粒上切下来的,完整的C2X载体我这也没有了,抱歉...

那仅仅是MBL载体呢,你们还有吗

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nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
55楼2016-06-09 09:15:51
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CarolChan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
55楼: Originally posted by prthefu at 2016-06-09 09:15:51
那仅仅是MBL载体呢,你们还有吗
...

C2X全称就是pMAL-C2X,两个是同一个东西,我现在用的这个载体,最近测序结果显示也有点问题,我也想要换个好的,但问了好多地方都找不着,买的话又太贵。。。
56楼2016-06-13 13:48:09
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prthefu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
56楼: Originally posted by CarolChan at 2016-06-13 13:48:09
C2X全称就是pMAL-C2X,两个是同一个东西,我现在用的这个载体,最近测序结果显示也有点问题,我也想要换个好的,但问了好多地方都找不着,买的话又太贵。。。...

这个载体用着不好吗?是也有出现什么问题吗?我之前查着,用MBL这个分子伴侣能增加蛋白可溶性,所以,我还想换这个载体呢。
nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
57楼2016-06-13 14:38:50
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CarolChan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
57楼: Originally posted by prthefu at 2016-06-13 14:38:50
这个载体用着不好吗?是也有出现什么问题吗?我之前查着,用MBL这个分子伴侣能增加蛋白可溶性,所以,我还想换这个载体呢。...

载体是好的,我有师兄师姐是用这个载体构建了重组菌,表达量也挺好。但是可能是因为保存久了还是怎么的,一些碱基突变了,所以在我手里虽然构建好了但一直没法表达
58楼2016-06-13 16:48:02
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希希xixi

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
47楼: Originally posted by tmoonday at 2016-06-04 20:11:04
一个,查一下是否是膜蛋白,是否有夸膜区。第二是,建议用pGEX系列载体试一下,GST标签促融。

请问一下,我的蛋白是跨膜蛋白,也一直诱导不出来。是跨膜蛋白应该用pGEX载体吗?
59楼2016-07-12 16:04:55
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