24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1344  |  回复: 26

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 拖尾

为什么一直拖尾,试了很多了,还这样

拖尾


拖尾-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

烟草书生

新虫 (初入文坛)

换引物
2楼2016-05-17 23:23:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

可能模版加多了
生物科学
3楼2016-05-18 07:36:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 科学小覃 at 2016-05-18 07:36:09
可能模版加多了

模版我都试了,不起作用了

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-05-18 07:45:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 1135482512 at 2016-05-18 07:45:27
模版我都试了,不起作用了
...

提高退火温度看看
生物科学
5楼2016-05-19 07:20:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 科学小覃 at 2016-05-19 07:20:41
提高退火温度看看...

退火我也提高了,你说是不是退火太高?

发自小木虫IOS客户端
6楼2016-05-19 08:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

PennieChueng

木虫 (小有名气)

你延伸时间加长,我以前遇到过,我试过12min可以了

发自小木虫Android客户端
7楼2016-05-19 09:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by PennieChueng at 2016-05-19 09:21:17
你延伸时间加长,我以前遇到过,我试过12min可以了

可是我的片段只有250bp左右

发自小木虫IOS客户端
8楼2016-05-19 09:30:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

PennieChueng

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 1135482512 at 2016-05-19 09:30:48
可是我的片段只有250bp左右
...

我不知道,我以前也是安这种方法做的,回来用的是其他实验室的方法,不过我做的是用quick change的方法做deletion.不过我建议你适当延长试一下!

发自小木虫Android客户端
9楼2016-05-19 09:35:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangwnehu

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by PennieChueng at 2016-05-19 09:35:10
我不知道,我以前也是安这种方法做的,回来用的是其他实验室的方法,不过我做的是用quick change的方法做deletion.不过我建议你适当延长试一下!
...

当引物特异性差或引物形成二聚体时,可重新设计引物或者使用巣式PCR
若模板或引物浓度过高,可适当降低模板或引物浓度
酶量过多,则适当减少酶量
Mg2+浓度偏高,则降低镁离子浓度
退火温度偏低,适当提高退火温度或使用二阶段温度法(94℃变性,65℃左右退火与延伸)
循环次数过多,不仅会降低扩增效率,且会使错误掺入率增加,因此需要减少循环次数。
10楼2016-05-19 12:50:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 1135482512 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +6 yexuqing 2026-04-19 7/350 2026-04-23 12:32 by yexuqing
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +18 花田半亩~白 2026-04-21 18/900 2026-04-23 11:31 by 12021227
[考研] 有没有学校收留 +3 蒋昌鹏qtj 2026-04-20 3/150 2026-04-22 20:25 by 学员JpLReM
[考研] 312求调剂 +3 山河似你温柔 2026-04-22 3/150 2026-04-22 20:17 by 学员JpLReM
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[论文投稿] 急需审稿人!!! +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
请填处理意见