24小时热门版块排行榜    

查看: 1526  |  回复: 26
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 拖尾

为什么一直拖尾,试了很多了,还这样

拖尾


拖尾-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangwnehu

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by PennieChueng at 2016-05-19 09:35:10
我不知道,我以前也是安这种方法做的,回来用的是其他实验室的方法,不过我做的是用quick change的方法做deletion.不过我建议你适当延长试一下!
...

当引物特异性差或引物形成二聚体时,可重新设计引物或者使用巣式PCR
若模板或引物浓度过高,可适当降低模板或引物浓度
酶量过多,则适当减少酶量
Mg2+浓度偏高,则降低镁离子浓度
退火温度偏低,适当提高退火温度或使用二阶段温度法(94℃变性,65℃左右退火与延伸)
循环次数过多,不仅会降低扩增效率,且会使错误掺入率增加,因此需要减少循环次数。
10楼2016-05-19 12:50:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 27 个回答

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 科学小覃 at 2016-05-18 07:36:09
可能模版加多了

模版我都试了,不起作用了

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-05-18 07:45:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 1135482512 at 2016-05-18 07:45:27
模版我都试了,不起作用了
...

提高退火温度看看
生物科学
5楼2016-05-19 07:20:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1135482512

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 科学小覃 at 2016-05-19 07:20:41
提高退火温度看看...

退火我也提高了,你说是不是退火太高?

发自小木虫IOS客户端
6楼2016-05-19 08:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +7 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 7/350 2026-08-13 15:15 by sELn1rusD174
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] FileCode能看出啥? +8 要乐观耀哥 2026-08-10 26/1300 2026-08-13 12:01 by Tide man
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +9 瞬息宇宙 2026-08-12 9/450 2026-08-13 10:12 by Vivilian
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见