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darlingbear

新虫 (小有名气)

[求助] 做Western时,小分子蛋白转膜时间太久了会怎样? 已有4人参与

我要检测的蛋白大小是14kD,转膜用的200mA恒流,110分钟,结果条带很不明显,是不是转膜时间久了?

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darlingbear

新虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by shenhaiwang at 2016-05-20 17:01:27
转膜是湿法还是半干法?湿法110min应该可以的。最好将未转膜的SDS-PAGE进行染色,看看目的条带是否也是比较浅,才好判断是否是转膜的问题

我用的是湿法,但如果是转过了的话,应该是从胶转到了膜,又从膜里转走了吧

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16楼2016-05-21 08:41:14
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-05-17 07:48:23
看膜的孔径,如果蛋白比孔径大,转膜时间久了一般没有什么问题,比孔径小,就要把握下转膜条件。
2楼2016-05-16 23:05:18
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段李晓彤

银虫 (正式写手)

院士虫

3楼2016-05-17 06:52:36
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段李晓彤

银虫 (正式写手)

院士虫


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-05-17 07:48:58
我的21k,300毫安20分钟,200毫安我觉得四十分钟我算多了

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2016-05-17 06:55:11
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