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莫落

木虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌加IPTG诱导表达后收集的菌种呈白色,蛋白为没有颜色的膜蛋白已有4人参与

载体是pET28,使用的菌种是BL21-DE3。加入IPTG诱导表达以后,收集的菌种呈现白色,和未诱导的黄色呈鲜明对比。然而要表达的蛋白是没有颜色的膜蛋白。表达之前提过质粒酶切是对的,当然构建载体时测序也是对的。挂Ni2+柱后洗脱没有得到蛋白,求大神@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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zhangbing234

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 莫落 at 2016-05-13 14:11:07
你好!谢谢你的回答。污染的可能性应该不大,因为没有诱导的颜色是正常的,而两个都是来源一个克隆,二次接种才分开的。
另外,形成包涵体能使菌体颜色变白吗?
...

你好,包涵体是大肠杆菌体内的一种未折叠完毕的颗粒蛋白,量再大也不会改变菌体的颜色,建议你重新进行发酵诱导,控制微生物的污染,不要被杂菌污染了。
16楼2016-05-16 13:21:56
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903770076

新虫 (小有名气)

实验不成功,或者是培养的时间不够,没有出现颜色上的差异

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-05-13 11:58:55
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莫落

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 903770076 at 2016-05-13 11:58:55
实验不成功,或者是培养的时间不够,没有出现颜色上的差异

大哥你看清楚再回复好吗?
3楼2016-05-13 12:03:10
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903770076

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 莫落 at 2016-05-13 12:03:10
大哥你看清楚再回复好吗?...

好吧,看错了!

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-05-13 12:12:12
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