| 查看: 2792 | 回复: 21 | |||
G号糖木虫 (正式写手)
|
[求助]
荧光定量PCR 已有3人参与
|
||
|
最近要做某细菌的一个基因相对表达量，采用荧光定量pcr，现在有点搞不清楚的是先提取总RNA，然后买试剂盒的时候买的一步法RT-PCR试剂盒，我看它的说明书是先进行CDNA合成，然后进行pcr扩增。这样做的话产物是什么呢？反应中要我加的引物是我针对该基因序列设计出来的引物吗？那后续做荧光定量pcr时所加的模板就是前面做出来的pcr产物吗？引物还是加这个基因的特异性引物？ 才接触这块，请多多指教，谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子与遗传 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有197人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
wangranjun
荣誉版主 (知名作家)
广庭之惘然
-
专家经验: +106 - 应助: 108 (高中生)
- 贵宾: 2.351
- 金币: 33457.9
- 散金: 3850
- 红花: 153
- 沙发: 8
- 帖子: 5316
- 在线: 1310.2小时
- 虫号: 2234819
- 注册: 2013-01-11
- 性别: GG
- 专业: 药物毒理
- 管辖: 文学芳草园
2楼2016-05-12 15:05:25
wangranjun
荣誉版主 (知名作家)
广庭之惘然
-
专家经验: +106 - 应助: 108 (高中生)
- 贵宾: 2.351
- 金币: 33457.9
- 散金: 3850
- 红花: 153
- 沙发: 8
- 帖子: 5316
- 在线: 1310.2小时
- 虫号: 2234819
- 注册: 2013-01-11
- 性别: GG
- 专业: 药物毒理
- 管辖: 文学芳草园
6楼2016-05-12 18:02:31
chaperonesy
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 504.6
- 红花: 1
- 帖子: 75
- 在线: 18.5小时
- 虫号: 4118178
- 注册: 2015-10-04
- 专业: 植物结构学
9楼2016-05-13 13:52:23
|
cDNA合成就是反转录的过程，你会发现试剂盒中会给你提供oligo dt和随机六聚体引物，oligo dt为一段特殊的多聚t引物，可以特异的结合到mRNA的poly a上，所以用oligo dt反转录出来的产物为mRNA对应的cDNA，随机引物则会将总RNA反转录出来。推荐你多看看分子克隆这本书。此外RT-PCR为反转录PCR而荧光定量PCR为RT-qPCR,rt-qpcr和反转录的过程是独立的两个实验，首先将RNA反转录为cDNA然后在以合成的cDNA为模版做qPCR 发自小木虫Android客户端 |
14楼2016-05-14 20:10:10
G号糖
木虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1888.5
- 散金: 24
- 红花: 3
- 帖子: 352
- 在线: 78.5小时
- 虫号: 1769994
- 注册: 2012-04-21
- 专业: 食品科学基础
18楼2016-05-15 19:36:29
G号糖
木虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1888.5
- 散金: 24
- 红花: 3
- 帖子: 352
- 在线: 78.5小时
- 虫号: 1769994
- 注册: 2012-04-21
- 专业: 食品科学基础
3楼2016-05-12 15:23:04
wangranjun
荣誉版主 (知名作家)
广庭之惘然
-
专家经验: +106 - 应助: 108 (高中生)
- 贵宾: 2.351
- 金币: 33457.9
- 散金: 3850
- 红花: 153
- 沙发: 8
- 帖子: 5316
- 在线: 1310.2小时
- 虫号: 2234819
- 注册: 2013-01-11
- 性别: GG
- 专业: 药物毒理
- 管辖: 文学芳草园
4楼2016-05-12 16:55:20
G号糖
木虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1888.5
- 散金: 24
- 红花: 3
- 帖子: 352
- 在线: 78.5小时
- 虫号: 1769994
- 注册: 2012-04-21
- 专业: 食品科学基础
5楼2016-05-12 17:07:15
邹忌
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 5053.6
- 散金: 236
- 红花: 2
- 帖子: 272
- 在线: 65.2小时
- 虫号: 1465320
- 注册: 2011-10-28
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
7楼2016-05-12 18:12:56
star013 
新虫 (知名作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1488.5
- 散金: 831
- 红花: 33
- 帖子: 5395
- 在线: 493.3小时
- 虫号: 1401381
- 注册: 2011-09-14
- 专业: 法学
8楼2016-05-13 09:47:25
10楼2016-05-13 16:59:22
50