24小时热门版块排行榜    

查看: 1562  |  回复: 6

bz臭臭

新虫 (初入文坛)

[求助] 用酶法测定燕麦种子中的β-葡聚糖含量,显色液用的GOPOD 已有2人参与

用酶法测定燕麦种子中的β-葡聚糖含量,显色液用的GOPOD,酶标仪510nm测定吸光度,葡萄糖标曲的OD值为何比空白的要低呢?
葡萄糖浓度μg/ml        0                 100                                 200                           300             400               空杯子
510nm吸光值        0.041900001        0.041299999        0.042100001        0.041999999          0.0405            0.048300002

我做了三次,都是标曲的0值是最5个值里边最大的,我现在找不到问题,怀疑是试剂有问题,准备重新配试剂,再做一次,GOPOD的配置  :葡萄糖试剂缓冲(储备)液:称取34g 磷酸二氢钾、10.5g 氢氧化钠和7.5g 对羟基苯甲酸在室温下溶解在200ml 的水中。用2mol/L 的盐酸或2mol/L 的氢氧化钠调整溶液的pH 至7.4,然后加入1g 的叠氮钠。用水调整体积至250ml。在4℃下暗处贮存,至少稳定1 2 个月。
葡萄糖试剂缓冲工作液:量取50ml葡萄糖试剂缓冲(储备)液, 用水调整体积至1000ml,加入80mg 4- 氨基非那宗,10mg 过氧化酶和200mg 葡萄糖氧化酶,溶解并置于棕色瓶内,在4 ℃下暗处贮存,该溶液稳定3 个月。

这个葡萄糖氧化酶加200mg的酶活力单位应该是多少啊,查文献查不到,求助求助求助!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Anemone静爷

新虫 (小有名气)

亲,请问你是做燕麦研究的吗?我想求助一下,如果我做燕麦米的话,需要添加什么辅料?

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-05-12 00:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海豚彦彦

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

首先,510nm下检测的是红色,那你的标准品反应后的颜色是什么颜色呢?
另外,你的方法参考的哪里的呢?是什么标准,AOAC 995.16吗?
GOPOD是跟葡萄糖显色的吧,所以葡聚糖需要先分解为葡萄后再参与反应。
3楼2016-05-31 14:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海豚彦彦

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

明白了,你用的方法是改良后的酶法,利用氢氧化钠溶液处理并用酸中和后,用经纯化处理的纤维酶将样品中的β-葡聚糖酶解成葡萄糖。经调整体积和离心分离后,生成的葡萄糖用葡萄糖氧化酶-过氧化酶方法在可见分光光度计上510nm 处测定。
4楼2016-05-31 17:02:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bz臭臭

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 海豚彦彦 at 2016-05-31 17:02:37
明白了,你用的方法是改良后的酶法,利用氢氧化钠溶液处理并用酸中和后,用经纯化处理的纤维酶将样品中的β-葡聚糖酶解成葡萄糖。经调整体积和离心分离后,生成的葡萄糖用葡萄糖氧化酶-过氧化酶方法在可见分光光度计 ...

是的呢,我的反应之后就没有颜色变化,我也找不到原因,老师您说应该是什么问题呢?期间换过一次葡萄糖氧化酶
5楼2016-06-29 17:16:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)


6楼2016-06-29 17:49:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

juezhuo000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

张家口一康   我们可以做   买一个燕麦葡聚糖检测的试剂盒就可以,按说明书配置药剂
得意淡然失意坦然
7楼2016-12-17 14:32:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bz臭臭 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +7 羊腰板 2026-08-21 7/350 2026-08-21 21:28 by iwuli
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 12/600 2026-08-21 19:46 by kulium
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见