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用酶法测定燕麦种子中的β-葡聚糖含量,显色液用的GOPOD 已有2人参与
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用酶法测定燕麦种子中的β-葡聚糖含量,显色液用的GOPOD,酶标仪510nm测定吸光度,葡萄糖标曲的OD值为何比空白的要低呢? 葡萄糖浓度μg/ml 0 100 200 300 400 空杯子 510nm吸光值 0.041900001 0.041299999 0.042100001 0.041999999 0.0405 0.048300002 我做了三次,都是标曲的0值是最5个值里边最大的,我现在找不到问题,怀疑是试剂有问题,准备重新配试剂,再做一次,GOPOD的配置 :葡萄糖试剂缓冲(储备)液:称取34g 磷酸二氢钾、10.5g 氢氧化钠和7.5g 对羟基苯甲酸在室温下溶解在200ml 的水中。用2mol/L 的盐酸或2mol/L 的氢氧化钠调整溶液的pH 至7.4,然后加入1g 的叠氮钠。用水调整体积至250ml。在4℃下暗处贮存,至少稳定1 2 个月。 葡萄糖试剂缓冲工作液:量取50ml葡萄糖试剂缓冲(储备)液, 用水调整体积至1000ml,加入80mg 4- 氨基非那宗,10mg 过氧化酶和200mg 葡萄糖氧化酶,溶解并置于棕色瓶内,在4 ℃下暗处贮存,该溶液稳定3 个月。 这个葡萄糖氧化酶加200mg的酶活力单位应该是多少啊,查文献查不到,求助求助求助! |
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