| 查看: 558 | 回复: 4 | ||
[求助]
原核表达 已有2人参与
|
|
最近做原核表达遇到了不少问题，希望各位大神指教！！！ 1. 我18° 18小时和37°2个小时都做过诱导表达 最后在上清和包涵体里都看不到表达，想知道还应该怎么改条件吗？ 2.我取表达的菌液离心后发现沉淀都偏红，这是不是影响表达的一个因素？这是什么造成的？ 3.我加了gst诱导原核蛋白做对照，发现做了两次gst也没有原核表达。请问问题出在哪？我得操作回忆了一下都不是问题。 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner
已经有0人回复
-
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有135人回复
-
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
-
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner
已经有0人回复
-
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗
已经有0人回复
-
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner
已经有0人回复
-
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
jinchanzi
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1745.1
- 红花: 2
- 帖子: 282
- 在线: 97.5小时
- 虫号: 1100047
- 注册: 2010-09-15
- 性别: MM
- 专业: 免疫学
2楼2016-04-26 16:13:19
3楼2016-04-29 21:21:32
【答案】应助回帖
|
你可以用1mMIPTG37℃先诱导4小时。然后裂解上清，沉淀跑胶，有抗体的话直接WB看是否有表达，没有抗体，直接过柱子纯化一次看看。都没有，那你就得考虑密码子优化了，或者换成Rosste菌。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-04-29 21:26:58
soarrow
铁杆木虫 (正式写手)
酱油歪楼党
- MolEPI: 1
- 应助: 36 (小学生)
- 金币: 9904.6
- 红花: 20
- 帖子: 607
- 在线: 563小时
- 虫号: 1836931
- 注册: 2012-05-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒、病毒感染与宿主免疫
5楼2016-04-30 01:03:01