24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

w5239775hj

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 242.9
帖子: 31
在线: 15.4小时
虫号: 4496893
注册: 2016-03-12

[求助] 菌液pcr一直得不到目的条带已有4人参与

第一次菌液pcr如下图所示，第二次菌液pcr连条带都没有，问题到底出在哪里？？？

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼 2016-04-24 20:29:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

菜头Q

铜虫 (初入文坛)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 212.8
帖子: 45
在线: 26.3小时
虫号: 2874799
注册: 2013-12-16
专业: 病毒学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

一般来说，菌液PCR只是对重组质粒的一个初步鉴定，其结果的假阳性率很高。你可以挑菌到1.5mL EP管中，加入100 uL无抗性培养基摇1h，然后取1uL作为模板做PCR，电泳结果可能为阳性的继续扩就行了，但肯定逃不掉单克隆筛选这个重复性高、耗时长、劳动强度大的过程。你的PCR-电泳实验结果能说明的问题就是一组是有模板的，另一组没有模板。但是重点是你的实验目的是什么？鉴定连接结果还是转化结果？不说清楚得话感觉帮不上。