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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » SDS-PAGE电泳遇到的问题，学渣求解释～
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毒狼1206

新虫 (正式写手)

[交流] SDS-PAGE电泳遇到的问题，学渣求解释～ 已有20人参与

有一个师弟和一个师妹跑电泳，师弟跑的电泳都很好，但师妹跑的呢，有时会很不好，出现的现象如下图，请各位解释一下出现这种情况的原因，谢谢

SDS-PAGE电泳遇到的问题，学渣求解释～
IMG_4010.JPG


SDS-PAGE电泳遇到的问题，学渣求解释～-1
IMG_4011.JPG
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1楼 2016-04-20 21:50:56
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fengqingrusi

金虫 (著名写手)

超大个甲壳虫
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-24 21:46:35
至少有两个问题，第一是胶没有凝好，第二是点样量不均匀且过多.建议你重以上两点出发来解决此问题.

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海纳百川有容乃大，壁立千仞无欲则刚。
6楼2016-04-21 07:23:15
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hzc417853213

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胶可能没有混均匀，或者加样后长时间不电泳，已经扩散了

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7楼2016-04-21 07:31:49
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ksnxks

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
点样手要稳，点进去的时候要保持一定的速度，以免漂样，注意电泳时要保持电压或者电流的稳定。（还有，感觉你们用的溴酚蓝有点多，一般这样会降低样的含量），以上纯属个人鄙见，大牛勿喷。

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3楼2016-04-20 22:17:09
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docseason

至尊木虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
左边的marker吗？marker都没有跑开，这配方可能都不合适，浓度高了

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8楼2016-04-21 08:22:33
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xgwcat

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能的原因:1电流过大，胶有些溶。降低电压至120v看看。2样品中盐浓度过大或样品中核酸类太多。把样品稀释，充分离心，减少上样量看结果怎么样。3电泳缓冲液时间长了染菌了。建议每次电泳用新配的running buffer

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不断学习中
16楼2016-04-23 07:35:34
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普通回帖

白玉子双

金虫 (小有名气)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-24 21:47:10
请问你的loading 每一管用量都一样吗？感觉有的深有的浅（颜色），还是蛋白之间浓度差别太大了。
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独立做自己
2楼2016-04-20 22:09:09
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wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
补充，建议看下制胶是否有问题

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4楼2016-04-21 00:56:57
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bigporpoise

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
樣品是否有除鹽，有時鹽份高也會這樣

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5楼2016-04-21 05:59:15
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
样品盐浓度过高或胶没配好

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9楼2016-04-21 08:51:38
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jinfangli

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
maker都被挤成这样了？？额，胶需要延长时间凝固，样品浓度或者盐浓度过高，上样缓冲没混匀。
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fight
10楼2016-04-22 11:56:08
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