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毒狼1206

新虫 (正式写手)

[交流] SDS-PAGE电泳遇到的问题,学渣求解释~ 已有20人参与

有一个师弟和一个师妹跑电泳,师弟跑的电泳都很好,但师妹跑的呢,有时会很不好,出现的现象如下图,请各位解释一下出现这种情况的原因,谢谢

SDS-PAGE电泳遇到的问题,学渣求解释~
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SDS-PAGE电泳遇到的问题,学渣求解释~-1
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fengqingrusi

金虫 (著名写手)

超大个甲壳虫

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-24 21:46:35
至少有两个问题,第一是胶没有凝好,第二是点样量不均匀且过多.建议你重以上两点出发来解决此问题.

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海纳百川有容乃大,壁立千仞无欲则刚。
6楼2016-04-21 07:23:15
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hzc417853213

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
胶可能没有混均匀,或者加样后长时间不电泳,已经扩散了

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7楼2016-04-21 07:31:49
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ksnxks

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
点样手要稳,点进去的时候要保持一定的速度,以免漂样,注意电泳时要保持电压或者电流的稳定。(还有,感觉你们用的溴酚蓝有点多,一般这样会降低样的含量),以上纯属个人鄙见,大牛勿喷。

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3楼2016-04-20 22:17:09
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docseason

至尊木虫 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
左边的marker吗?marker都没有跑开,这配方可能都不合适,浓度高了

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8楼2016-04-21 08:22:33
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xgwcat

金虫 (初入文坛)


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可能的原因:1电流过大,胶有些溶。降低电压至120v看看。2样品中盐浓度过大或样品中核酸类太多。把样品稀释,充分离心,减少上样量看结果怎么样。3电泳缓冲液时间长了染菌了。建议每次电泳用新配的running buffer

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不断学习中
16楼2016-04-23 07:35:34
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白玉子双

金虫 (小有名气)

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-04-24 21:47:10
请问你的loading 每一管用量都一样吗?感觉有的深有的浅(颜色),还是蛋白之间浓度差别太大了。
独立做自己
2楼2016-04-20 22:09:09
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wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)


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补充,建议看下制胶是否有问题

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4楼2016-04-21 00:56:57
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bigporpoise

铜虫 (初入文坛)


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樣品是否有除鹽,有時鹽份高也會這樣

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5楼2016-04-21 05:59:15
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)


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样品盐浓度过高或胶没配好

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9楼2016-04-21 08:51:38
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jinfangli

铜虫 (小有名气)


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maker都被挤成这样了??额,胶需要延长时间凝固,样品浓度或者盐浓度过高,上样缓冲没混匀。
fight
10楼2016-04-22 11:56:08
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