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kingjazz23金虫 (小有名气)
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PCR条带 已有2人参与
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PCR后 跑胶的时候没有条带出来 右边为marker 片段大小1500左右 前面的两个应该是引物二聚体吧 cDNA是新的 引物为去年找公司合成的 用的是easy taq酶 体系为“94 5分钟 94 30秒 56 30秒 72 1分钟 72 10分钟” 之前也跑过一次 cDNA是去年的 连前面的两个引物二聚体也没有 这次cDNA是新的 也没跑出来 因为没什么经验 所以不太清楚什么原因 请大家帮忙分析一下  发自小木虫IOS客户端 |
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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首先你的胶跑的质量太差了，成像仪参数也没设置好，具体你的目的片段多大也不清楚，cDNA质量怎么样也不清楚，引物退火温度有没有摸索呢…… 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-04-02 21:01:40
kingjazz23
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成像的时候主要是因为胶的底下铺了一张保鲜膜 可能铺得不平整 新的cDNA的260/280在2.0以上 当时怀疑有DNA的污染 退火温度之前考察过 之前用这个温度跑是可以跑出来的 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2016-04-03 08:54:17
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6楼2016-04-03 16:16:12
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7楼2016-04-06 16:03:53