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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 溶解曲线出峰温度低，且峰值小
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yaodemi

新虫 (初入文坛)

[求助] 溶解曲线出峰温度低，且峰值小 已有1人参与

做了几回荧光定量PCR，结果溶解曲线出峰都在65-70摄氏度之间，退火温度是55℃，峰值也小，在0.7左右，倒是只有一个峰。想问这正常吗，如果不正常是什么问题，怎么改善？谢谢

溶解曲线出峰温度低，且峰值小
Melt Curve.jpg
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1楼 2016-03-28 19:16:34
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yaodemi: 金币+15, ★★★★★最佳答案 2016-03-30 18:39:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by yaodemi at 2016-03-30 09:10:44
峰值不一样可以吗...

峰值不一样，即峰不重叠说明你的引物扩增不是特异的，有非特异性扩增。最好重新设计引物
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4楼2016-03-30 12:06:32
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yaodemi: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-30 09:12:31
关键是所有的样本是溶解曲线峰值重合就行。
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2楼2016-03-29 17:01:21
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yaodemi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-03-29 17:01:21
关键是所有的样本是溶解曲线峰值重合就行。

峰值不一样可以吗
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3楼2016-03-30 09:10:44
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yaodemi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 卡维斯 at 2016-03-30 12:06:32
峰值不一样，即峰不重叠说明你的引物扩增不是特异的，有非特异性扩增。最好重新设计引物...

谢谢
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5楼2016-03-30 18:38:45
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