应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 候选基因扩增，求助！！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 380  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

空地上的飞鹰

新虫 (小有名气)

[求助] 候选基因扩增，求助！！ 已有1人参与

各位虫友，大家好，我做的是大豆突变体定位。最近，一直在做候选基因的筛选。主要是测序。但最近利用突变体的RNA进行转录组测序，其琼脂糖凝胶的条带总是看不见，二次PCR时也没有多少条带。而且有条带的其条带大小却和我的基因大小相差很多。另外测序回来的样品好多有双峰，应该怎样避免双峰。恳请大家给点建议。
1.括基因应该注意啥?
2.琼脂糖凝胶120v，400mA这样设计可以不？
3.双峰怎么避免？谢谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-03-25 14:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空地上的飞鹰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tbsjxy at 2016-03-25 15:21:15
第一，首先你要确保你RNA提取没有问题，你检测都看不见条带，确定可以做下去？建议用试剂盒提。
第二，扩增条带和目的基因差很多的话，先确定一下你设计的引物特异性好不好，如果没有问题的话，差别大的话也是有可 ...

谢谢，我感觉也是，我测了一下Rna的浓度才50多，不知道多少比较合适？我就用的试剂盒提的。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-25 19:29:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

tbsjxy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一，首先你要确保你RNA提取没有问题，你检测都看不见条带，确定可以做下去？建议用试剂盒提。
第二，扩增条带和目的基因差很多的话，先确定一下你设计的引物特异性好不好，如果没有问题的话，差别大的话也是有可能，考虑是插入突变或融合基因的可能。
第三，测序双峰，最直接的解决方法是构建载体去测序，当然也可以考虑先切胶回收试试，具体要看看胶图怎么样，建议问下测序公司客服的意见。
根据楼主的叙述，问题出在第一步的可能性较大。
赞一下(1人) 回复此楼
该用户由于违规已被禁言一辈子
2楼2016-03-25 15:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +5 梁富贵险中求 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:51 by 无际的草原
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 求调剂 +6 熊二想上岸 2026-04-04 6/300 2026-04-04 20:43 by imissbao
[考研] 085602 找调剂 +4 逆时针快乐 2026-04-02 4/200 2026-04-04 19:32 by 蓝云思雨
[考研] 材料383求调剂 +5 郭阳阳阳成 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:06 by dongzh2009
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 085600，320分求调剂 +14 大馋小子 2026-04-04 15/750 2026-04-04 16:27 by 无际的草原
[考研] 0856调剂 +8 曲听筠 2026-03-30 8/400 2026-04-04 08:46 by tianyyysss
[考研] 265求调剂 +17 林深温澜 2026-04-01 20/1000 2026-04-04 01:09 by userper
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
[考研] 兽医调剂 +3 wh119216 2026-04-02 3/150 2026-04-03 19:34 by zrongyan
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[考研] 315分 085602 求调剂 +15 26考研上岸版26 2026-04-02 15/750 2026-04-03 12:45 by xingguangj
[考研] 085600，320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 275学硕081000服从调剂到其他专业，保不住本专业了 +7 一只小小水牛 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:23 by alice-2022
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +4 wwwwffffff 2026-03-31 7/350 2026-04-01 15:23 by wwwwffffff
[考研] 311求调剂 +10 李芷新1 2026-03-31 10/500 2026-04-01 14:38 by chenqifeng666
[考研] 本2一志愿C9-333分，材料科学与工程，求调剂 +9 升升不降 2026-03-31 9/450 2026-03-31 18:01 by 无际的草原
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭