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温柔一刀刀

新虫 (初入文坛)

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[求助] 【求助】帮忙看一下文献中这个real time PCR结果，弄糊涂了已有2人参与

第一个问题：图中纵坐标的△ct，是说明△ct公式还是说纵坐标的值就是△ct呢？
另外，如果△Ct是正值，说明目的基因原始拷贝数低于内参基因，△CT越大，说明目的基因mRNA表达越低啊，
图注中为什么说是更高呢？
糊涂了
第二个问题：如果是临床组织标本做相对定量，最终看有没有统计学意义，是不是应该算出每例标本中目的基因的2~-△△CT或是2~-△ct，然后进行统计分析啊，还是直接用△CT做统计分析?
高手们帮忙看看，多谢啦！

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催化版上2008-04-25前沸石分子筛，ZSM-系、SAPO-系共466个话题集锦已经有110人回复

雄关漫道真如铁~

1楼 2016-03-22 18:43:07

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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆不喜欢发脾气

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专业: 植物生理与生化

【答案】应助回帖

嗯......................
比内参，你可以当成绝对表达量（虽然和绝对定量没关系），只是校正样品间差异，这时的结果是相对于内参基因的表达量。
第二个deltaCT比不同样品间同一基因的表达变化，就是把目标（被减去)样品中该基因校正为1，其他样品中同一基因是它的相对表达量。
一般，做处理的实验一般以这种形式表达。目标样品就是Control组，对比样品就是实验组。第一步，校正样品间差异（就是比内参)，第二布，进行样品间，同一基因比较。