| 查看: 1637 | 回复: 12 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
重组时质粒与目的片段连不上！求帮解答~ 已有2人参与
|
||
| 我最近用SphI和KpnI双酶切质粒5400bp和目的片段1431bp，用T4连接酶进行连接，之后转化，板长得很正常，但是菌液PCR时不能P出目的条带，已经重复好几次连接转化了还是不能P出目的条带，是否有什么高见？求解答！谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有104人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
5楼2016-03-22 19:32:59
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小秀子子: 金币+3 2016-03-22 19:33:16
感谢参与，应助指数 +1
小秀子子: 金币+3 2016-03-22 19:33:16
|
一方面在进行重新处理载体和片段时，建议将上次酶切处理过得载体片段也加入体系再次酶切进行连接转化，这样可以保证最后是有一部分经过两次酶切的，处理应该比较完全。另一方面，做菌液pcr，虽然简便但是常常会有些异常状况，最准确的方法应该是提取质粒做双酶切验证。祝好！ 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-03-21 16:24:30
3楼2016-03-21 20:19:46
star013 
新虫 (知名作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1488.5
- 散金: 831
- 红花: 33
- 帖子: 5395
- 在线: 493.3小时
- 虫号: 1401381
- 注册: 2011-09-14
- 专业: 法学
4楼2016-03-22 08:17:24
30