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trizol 法提取植物总RNA. 已有2人参与
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| 本人最近在用trizol法提取植物总RNA,但不知道所用方法是不是最优化,求trizol法提取植物总RNA比较优化的方法以及后续的琼脂糖凝胶检测RNA质量的具体操作步骤和注意事项。谢谢各位大神指点了!! |
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jackyoung
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看啥植物和什么组织了,富含多糖多酚的用Trizol效果不好。琼脂糖电泳很简单,最好用DEPC水配缓冲液,专用的电泳槽,1.2%的胶,最好将样品预染,总上样量1ug左右(此处为我们实验室的经验体系,因检测方法而异) 发自小木虫Android客户端 |

2楼2016-03-07 21:12:51
【答案】应助回帖
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首先所有的离心管研钵镊子药匙等用具都要做除RNA酶处理,这是实验成功的关键。 1ml 提取液里加适当液氮研磨的组织粉末充分混匀,静置5min,离心5min,取上清加五分之一提取液体积的氯仿混匀,静置5min,离心15min,取上清加等体积异丙醇静置10min离心10min,弃上清,沉淀加75%乙醇离心5min,空干乙醇加RNase free water溶解RNA即可。 电泳的话最好是专门跑RNA的一套装置,我们用TAE 跑10min就行。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-03-07 22:19:56
a314919473
银虫 (著名写手)
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