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PCR 条带不亮
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| PCR扩增几条氮循环相关的基因，引物是由已知序列设计的，但是扩增结果不理想，大多数条带都不是很亮，与所跑Marker 相差甚远。试图增加过扩增循环数，但是效果不理想，也增加过退火温度，但有的基因就直接扩增不出来。求问各位大神这是怎么回事？能否给点参考意见。不甚感激。 |
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2楼2016-03-04 15:21:03
ken19860823
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3楼2016-03-04 15:41:08
4楼2016-03-04 17:00:03
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qiu_ni: 金币+1 2016-03-05 13:33:11
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他说的是降落pcr？最佳的退火温度需要摸索 我的方法是用梯度pcr仪不用温度都p一遍，还有一个方法就是二次pcr，基本就很亮了 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-03-04 18:31:53
sandycool
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6楼2016-03-04 20:29:22
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qiu_ni: 金币+1 2016-03-05 13:32:55
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qiu_ni: 金币+1 2016-03-05 13:32:55
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建议你用第一次的PCR产物为模板，再进行一次pcr，我今天就是这样的，克隆一个植物里面的酶基因，你试试吧。pcr的条件可以不用改 发自小木虫IOS客户端 |
7楼2016-03-04 20:44:07
8楼2016-03-07 20:07:20