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cwaq123

新虫 (初入文坛)

[求助] 如果PCR产物要进行酶切的话,是不是不能用mix酶来跑PCR,而应该选择普通的酶 已有1人参与

各位好,我是新手,有个问题想请教下,如果PCR产物要进行酶切的话,是不是不能用mix酶来跑PCR,而应该选择普通的酶,就是那种有DNTP、BUFFER、Mg离子这几个成分分开装的酶
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原海亮

木虫 (著名写手)

没这样的要求吧,都可能的,只是看你PCR产物的特异性来选择胶回收还是直接柱纯化

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-03-04 12:10:56
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卡维斯

金虫 (正式写手)

应该可以的,如果只是酶切验证的话可以直接用,如果要构建载体的还是楼上说的对
3楼2016-03-07 21:02:47
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jackyoung

新虫 (正式写手)

无关,最后到体系里都是有那些东西。
建议:最后切的时候适当通过放大体系的方法来稀释掉PCR Buffer造成的影响,基本放大一倍就没有问题了,亲测多年。

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CestLaVie
4楼2016-03-08 00:05:21
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谢开龙

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用mix也可以,只是有必要通过测序看下是否错配

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5楼2016-03-08 00:11:53
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