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竹林樱草
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EMSA问题请教
大家好,最近在做EMSA实验,目的是想得到不同化合物作用于蛋白后,对DNA的结合能力的差异,但是做了几次,要不就是没差异,要不就是没有结合的DNA条带,大神们我该如何改进实验呢?游离的DNA和结合的DNA转膜时间会不会又区别呢?请高手赐教!不胜感激
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2016-03-03 20:54:47
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atlanticwi
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嗯........................
首先,你都没有做出差异(原文如此),你调实验方式是没有意义的。化学物质调节蛋白对DNA的结合,我认为肯定是一个至少是比较敏感的作用。也就是说,至少你实验应该很容易做出来非有即无得效果,你即使做出很微弱的差异,不说别的,这个化合物的作用意义也无法体现。
个人观点,请高手指正
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11楼
2016-03-26 14:25:36
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jackyoung
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主要是调节两者input的量和比例,EMSA想曝光个漂亮片子不容易。转膜时间没有影响
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CestLaVie
2楼
2016-03-04 00:15:45
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2楼
:
Originally posted by
jackyoung
at 2016-03-04 00:15:45
主要是调节两者input的量和比例,EMSA想曝光个漂亮片子不容易。转膜时间没有影响
但是我调整比例,也就是蛋白的量足够多的情况下,游离的DNA还是有很多,结合的DNA却没有梯度显示
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3楼
2016-03-04 10:54:10
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3楼
:
Originally posted by
竹林樱草
at 2016-03-04 10:54:10
但是我调整比例,也就是蛋白的量足够多的情况下,游离的DNA还是有很多,结合的DNA却没有梯度显示...
说的是比例,两个都得调,要不背景太高看不出来。
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竹林樱草
CestLaVie
4楼
2016-03-04 21:18:33
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