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汕头大学海洋科学接受调剂
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竹林樱草

新虫 (小有名气)

[求助] EMSA问题请教

大家好,最近在做EMSA实验,目的是想得到不同化合物作用于蛋白后,对DNA的结合能力的差异,但是做了几次,要不就是没差异,要不就是没有结合的DNA条带,大神们我该如何改进实验呢?游离的DNA和结合的DNA转膜时间会不会又区别呢?请高手赐教!不胜感激
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jackyoung

新虫 (正式写手)

主要是调节两者input的量和比例,EMSA想曝光个漂亮片子不容易。转膜时间没有影响

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CestLaVie
2楼2016-03-04 00:15:45
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竹林樱草

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jackyoung at 2016-03-04 00:15:45
主要是调节两者input的量和比例,EMSA想曝光个漂亮片子不容易。转膜时间没有影响

但是我调整比例,也就是蛋白的量足够多的情况下,游离的DNA还是有很多,结合的DNA却没有梯度显示
3楼2016-03-04 10:54:10
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jackyoung

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 竹林樱草 at 2016-03-04 10:54:10
但是我调整比例,也就是蛋白的量足够多的情况下,游离的DNA还是有很多,结合的DNA却没有梯度显示...

说的是比例,两个都得调,要不背景太高看不出来。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

CestLaVie
4楼2016-03-04 21:18:33
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竹林樱草

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by jackyoung at 2016-03-04 21:18:33
说的是比例,两个都得调,要不背景太高看不出来。
...

好的,谢谢啦
5楼2016-03-05 15:33:22
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star013

新虫 (知名作家)


6楼2016-03-05 15:38:42
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竹林樱草

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by star013 at 2016-03-05 15:38:42
我们可以接这类实验

你们是做这方面的吗?
7楼2016-03-08 21:15:52
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star013

新虫 (知名作家)


对的,我们做了很多这种实验了

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8楼2016-03-09 09:30:22
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huangqi2016

新虫 (小有名气)

如何控制好曝光时间呢?

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9楼2016-03-13 11:19:02
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竹林樱草

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by huangqi2016 at 2016-03-13 11:19:02
如何控制好曝光时间呢?

曝光时间也是试出来的,先曝光20s、30s、1min,多试几个就可以啦
10楼2016-03-26 11:55:56
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