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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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竹林樱草

新虫 (小有名气)

[求助] EMSA问题请教

大家好，最近在做EMSA实验，目的是想得到不同化合物作用于蛋白后，对DNA的结合能力的差异，但是做了几次，要不就是没差异，要不就是没有结合的DNA条带，大神们我该如何改进实验呢？游离的DNA和结合的DNA转膜时间会不会又区别呢？请高手赐教！不胜感激
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1楼 2016-03-03 20:54:47
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竹林樱草

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by huangqi2016 at 2016-03-13 11:19:02
如何控制好曝光时间呢？

曝光时间也是试出来的，先曝光20s、30s、1min，多试几个就可以啦
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10楼2016-03-26 11:55:56
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jackyoung

新虫 (正式写手)
主要是调节两者input的量和比例，EMSA想曝光个漂亮片子不容易。转膜时间没有影响

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CestLaVie
2楼2016-03-04 00:15:45
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竹林樱草

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jackyoung at 2016-03-04 00:15:45
主要是调节两者input的量和比例，EMSA想曝光个漂亮片子不容易。转膜时间没有影响

但是我调整比例，也就是蛋白的量足够多的情况下，游离的DNA还是有很多，结合的DNA却没有梯度显示
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3楼2016-03-04 10:54:10
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jackyoung

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 竹林樱草 at 2016-03-04 10:54:10
但是我调整比例，也就是蛋白的量足够多的情况下，游离的DNA还是有很多，结合的DNA却没有梯度显示...

说的是比例，两个都得调，要不背景太高看不出来。

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竹林樱草
CestLaVie
4楼2016-03-04 21:18:33
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