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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] Gibson Assembly 一直做不出来,好伤心已有2人参与

我的片段大小:
片段1:6823bp
片段2:499bp
片段3:400bp

片段浓度:
片段1:112.5ng/ul
片段2:126.2ng/ul
片段3:113.3ng/ul

我的mix之前用的NEB mix ,今天又重新配了一次。

之前的体系
片段1:6ul
片段2:0.35ul
片段3:0.35ul
mix:6.65ul
50度1小时。
不行。

今天我做了一个体系:
片段1:2ul
片段2:1.2ul
片段3:1.2ul
mix:4.4ul



片段1:1.5ul
片段2:1.8ul
片段3:1.8ul
mix:5.1ul


还有一个
片段1:1.5ul
片段2:1.8ul
片段3:1.8ul
mix:5.1ul
ddH2O:4.9ul

请大神帮忙看看
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redking2012

木虫 (正式写手)

如果是质粒的话,四段一起连,然后直接做转化,不要跑电泳鉴定。如果连接产物是片段,连接完了直接取一微升做模版进行pcr

发自小木虫IOS客户端
9楼2016-02-27 23:00:48
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)

2楼2016-02-27 09:24:16
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更恋秋风

铁杆木虫 (小有名气)

3楼2016-02-27 09:24:29
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


4楼2016-02-27 10:31:55
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