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prthefu木虫 (著名写手)
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电泳条带拖尾和出现杂带 已有3人参与
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PCR后进行跑胶检测,发现跑完胶之后,在紫外照射之前,拿到的胶为下面的那种情况,肉眼看到的后面两个图中,其中浅蓝色的为目的条带,但是两位的那些深蓝色的是什么啊,是非特异条带吗? 还有,在紫外照射图片中,目的条带跑成那样,能进行胶回收吗? P60226-091039-001.jpg.JPG P60226-091313.jpg.JPG P60226-091345.jpg.JPG |
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prthefu
木虫 (著名写手)
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7楼2016-03-01 08:22:19
fjtony163
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2楼2016-02-26 09:46:11
xiangyingliu
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可以的胶回收了,前面的蓝色的条带是溴酚蓝,代表的片段大小是 300bp,后面的有点绿色的条带是二甲苯青,代表的片段大小在4000bp左右。 loading buffer的功能主要有两个。第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳;第二,里边的成分甘油可以加大样品密度,使样品密度大于TAE,从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔。另外,有的Buffer是加有SDS的,一般都会写明。SDS主要是促使聚合酶变性,因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的迁移速率。细胞裂解后的裂解液,加loading 100℃加热,也是为了中止酶促反应,防止提取的蛋白质降解 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-02-26 09:48:19
xiangyingliu
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4楼2016-02-26 09:49:13













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