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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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prthefu

木虫 (著名写手)

[求助] 跑胶条带中，marker清晰但目的条带不够亮 已有4人参与

把PCR产物进行电泳后，对1%Agarose和1.5%Agarose两个浓度下的条带图谱有小疑惑。
希望能有人帮忙解答：
    下面电泳图谱中，左、右边分别为1%和1.5%Agarose的电泳图，其中1%的目的条带很亮，右边的Marker条带较为模糊；但是在1.5%Agarose的电泳图中，Marker条带清晰，目的条带却不如之前的亮，所以我现在不太确定，到底是选择哪个浓度做。
    再说明一下，我后面对PCR产物进行连接转化，所以，我是选择目的条带亮的还是Marker条带清晰的呢？

跑胶条带中，marker清晰但目的条带不够亮
1%和1.5%Agarose电泳图.jpg.JPG
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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
1楼 2016-02-25 20:42:55
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lucialee0807

铜虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-02-28 10:09:48
你可以做个对比实验，同样的产物同样的量点不同的胶，marker也点一样的，跑胶的程度也是一样的，要跑到一样的位置，不要像这样左边的跑的开一点，然后再对比下看看

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9楼2016-02-26 17:01:14
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mr.clutch

新虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-02-28 10:09:14
胶浓度并不能给你后续实验造成实质性影响啊！1%或1.5%都可以进行胶回收，关键是你的目的产物要达到足够的量才能保证你胶回收或者PCR纯化之后得到足够浓度的目的产物以满足后续连接之需

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2楼2016-02-26 00:39:22
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管昌红

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mr.clutch at 2016-02-26 00:39:22
胶浓度并不能给你后续实验造成实质性影响啊！1%或1.5%都可以进行胶回收，关键是你的目的产物要达到足够的量才能保证你胶回收或者PCR纯化之后得到足够浓度的目的产物以满足后续连接之需
...

我回收前很亮 回收后为啥不亮了呢！洗脱了两次

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3楼2016-02-26 01:36:26
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prthefu

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mr.clutch at 2016-02-26 00:39:22
胶浓度并不能给你后续实验造成实质性影响啊！1%或1.5%都可以进行胶回收，关键是你的目的产物要达到足够的量才能保证你胶回收或者PCR纯化之后得到足够浓度的目的产物以满足后续连接之需
...

再重复做1%Agarose跑胶，发现同样的条件，目的条带跑出的比如之前的亮，如果做胶回收，是不是要求目的条带要足够亮，而且，我还想问，做胶用的是那种大孔胶，上样量应该是多少啊，还有，在切胶时，都需要注意上么啊
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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
4楼2016-02-26 09:19:46
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