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分类 共搜索到 64 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
微生物 毕赤酵母培养常用培养基
2.6YPDS+Zeocin培养基(YeastExtractPeptoneDextroseMedium)：yeastextract1%peptone2%dextrose(glucose)2%sorbitol1M+agar2%Zeocin100μg/ml不管是液体YPDS培养基，还是YPDS+Zeocin培养基，...
 青椒之路 2022-08-18 01:38
医学 基础实验：教你阅读质粒图谱
真核筛选标记用的是嘌呤霉素(Puro),G418,潮霉素β(Hygr)原核和真核都可以的筛选标记,Zeocin、Blasticidin(通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性抑制原核和真核生物的蛋白质合成),我们做...
 白奥思科 2022-07-20 03:24
分子生物 毕赤酵母不表达蛋白
虫友们，我最近做了溶菌酶的点突变，测序验证没有问题，转酵母X33后用zeocin筛选，最高浓度都到400了，但是接摇瓶诱导后，既没有酶活，跑蛋白电泳也没有一点条带，测了蛋白浓度非常低应该是...
 CYdayuan 2022-05-24 08:29
分子生物 毕赤酵母pGAPZαA转化染菌问题
求助毕赤酵母转化过程中的问题，使用的是pGAPZαA质粒，Zeocin浓度100ug/ml，感受态使用山梨醇处理制备而成，现做现用，转化后对照平板总是长菌，不知道原因，师姐就没遇到过类似问题，本人...
 云之遥V 2022-03-13 03:40
分子生物 pPICZαA质粒转化酵母细胞
pPICZαA是哪种类型的质粒？...如果是YIp（整合型质粒的）的话，是哪个区段与酵母的基因组在整合（5'AOX和3’AOX之间的区段吗），pPICZαA上的Zeocin整合到酵母基因组了吗？
 12zhangjie 2021-09-16 01:37
分子生物 Zeocin的使用
各位虫友，最近从合作实验室拿了一个zeocin抗性的细胞系，他们跟我说细胞系筛选的浓度是200微克/ml，那么我在平时养这个细胞的时候，培养基里是否一直需要加这个浓度的zeocin维持，还是只...
 千里凌波 2021-09-04 12:04
分子生物 Killing curve
各位前辈小弟想用Blasticidin和Zeocin做HEK293的killingcurve,前辈们做过的大概浓度是怎么一个范围谢谢了
 FM每文 2019-12-16 11:35
分子生物 Zeocin加到培养基里可以4度保存吗？可以保存多久
请问我做细胞抗生素敏感度试验，Zeocin买回来是液体，-20度保存，加在培养基中可以4度保存吗？能保存多久？
 15761622115 2019-03-28 01:44
分析 请问博来霉素（zeocin CAS:11006-33-0）可以使用UV-vis分光光度...
如题，博来霉素（zeocinCAS:11006-33-0）这种药品的检测文献中能查到的一般是液相检测，检测器一般会用紫外检测器。也有用UPLC检测定量的。这种药品我用UV-2550扫了一下，254nm是有吸收峰的...
 j936765961 2018-09-10 09:14
分子生物 BP反应涂板后是满盘的菌斑，连成一片，而且看着像空载体。
BP反应涂板后是满盘的菌斑，连成一片，而且看着像空载体。我的片段是2kb左右，目的基因和载体浓度在15ng/ul左右3ul，载体1ul、36ng，TE4...涂板是抗生素zeocin。实在找不到问题所在，求教！
 芊默Anna 2018-06-27 08:45
分子生物 酿酒酵母转化sgRNA总失败是什么原因呢？
我给酿酒酵母转化sgRNA总是转不进去，酿酒酵母已经转了Cas9质粒，Cas9是zeocin抗性（工作浓度是50ug/ml），sgRNA是HYB抗性（工作浓度是150ug/ml）。一批有试过给不含Cas9的酿酒酵母转sgRNA...
 虫虫白白 2018-01-26 04:58
生物科学 大肠杆菌培养
大肠杆菌摇了一个晚上，培养基里出现白色颗粒状物质，是怎么回事？抗生素为Zeocin
 dajie1993 2017-12-12 03:26
分子生物 博来霉素（Zeocin）质粒提取浓度低
在提取博莱霉素抗性质粒的时候浓度很低，质粒是pGAPZαA，宿主菌是E.coliDH5α，博来霉素工作浓度25μg/ml，试剂盒用的是天根的，试剂盒本身没什么问题，提其他抗性的质粒浓度能达到300ng/...
 Forest666 2017-10-26 05:28
分子生物 Zeocin 低盐培养基
请问Zeocin筛选大肠杆菌突变株为什么要在低盐LB培养基?正常LB会让Zeocin失效？
 暮_紫_ 2017-07-28 08:27
学术会议 毕赤酵母电转化
最近做毕赤酵母电转化实验，第一次做时转化后，分10，25，50，100ul涂布Zeocin抗性平板，第二天长出白色一层，第三天在白色层上面想出了很多单菌落，可以挑选，用目地基因引物菌液pcr鉴定有...
 MeiPD 2017-06-24 12:00
微生物 关于PPICZα－A质粒重组后进行ZEOCIN抗性筛选的问题
我现在做PPICZα－A质粒重组后进行ZEOCIN抗性筛选，转化后16小时ZEOCIN平板上长出菌落（菌落还比较大），菌p有目的条带。平板上挑单菌摇瓶，单在液体培养基上长不起来。长了好久起来了提不...
 七只蛋挞 2016-12-27 11:30
微生物 zeocin
如何设计不同浓度梯度zeocin对毕赤酵母的耐受范围？
 莯栀 2016-06-13 12:33
硕博家园 提取大肠杆菌质粒
请问各位提取大肠质粒时候加zeocin的作用是什么？在什么时候加？活化和培养时候都加吗？要加多少呢。麻烦大家帮忙解答。
 陈成玉 2015-10-13 12:37
分子生物 关于转染的一些问题，求讨论！
目前在用Flp-InTRex-293做可诱导表达的稳转表达系，该细胞正常培养需要Zeocin和Blasticidin两种选择抗性维持，转染进外源重组质粒后，定点插入后会导致Zeocin抗性消失，获得HygromycinB抗性...
 sonny 2015-09-08 11:46
分子生物 毕赤酵母重组转化子pcr鉴定问题
54bp的同源序列作为pcr引物一部分，另加载体引物22bp，利用携带标签和筛选标记的质粒做模板进行pcr扩增，pcr产物测序正确，pcr产物纯化后电转化到毕赤酵母X33中，Zeocin筛选，30度培养3天后...
 yyong2 2015-08-07 03:54
微生物 毕赤酵母在筛选板上长的很好，但是PCR鉴定不出来是怎么回事？
一个用His缺陷筛选，一个用zeocin浓度筛眩电转之后两者都长的很好，甚至zeocin100ug/ml的板子，之前做电转都没长几个，这几次也长的不错。G418浓度也筛到0.3mg/ml了。可是我怎么都鉴定不...
 ggyy0911 2015-08-06 08:44
微生物 毕赤酵母X33每次电转以后就长成黄色菌落，怎么办
而且第二次的结果非常的诡异，我用四种浓度的zeocin筛选，结果高浓度的长满了，而且全是黄色菌，低浓度板却只有寥寥几个，中间还有一些形态正常的。如果是污染的话，我同批做的GS115，操作...
 ggyy0911 2015-04-20 12:21
分子生物 毕赤酵母X33每次电转以后就长成黄色菌落，怎么办
而且第二次的结果非常的诡异，我用四种浓度的zeocin筛选，结果高浓度的长满了，而且全是黄色菌，低浓度板却只有寥寥几个，中间还有一些形态正常的。如果是污染的话，我同批做的GS115，操作...
 ggyy0911 2015-04-20 12:41
分子生物 PPICZaA电转X-33，为什么要涂布YPDS平板
大家好，请教大家一个问题：在做真核表达时，ppiczaA载体线性化后电转化到毕赤酵母X-33，需要涂含Zeocin的YPDS平板,为什么呢？是不是可以直接涂含Zeocin的YPD平板？YPDS里的S即山梨醇，在...
 sweet561 2015-01-27 01:51
微生物 请教一个酵母YPDS培养基的问题
我看YPDS的配制都是加Zeocin的，但有的载体抗性并不是Zeocin，比如pPIC9k这种载体，抗性是Geneticin，但即使是这样，电转后也用含Zeocin的YPDS培养吗？这样做的原因是什么呀？此外，YPDS的...
 ggyy0911 2014-12-04 02:14
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