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分类	共搜索到 651 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

分子生物	基因工程与蛋白表达为了利用细菌自身的信号分子诱导蛋白表达，而不是...想用的质粒是pET-28a，如果把我的序列插入多克隆位点，目的蛋白的表达是不是由我的启动子控制的？不加IPTG的诱导蛋白会表达吗？求帮助！	gqc1102	2026-06-04 03:14
硕博家园	蛋白表达情况异常我在pET28a载体上插入一个双组分蛋白的基因B和A，此时B基因在BL21（DE3）中主要表达，A基因基本不表达。于是选择在A基金前添加一个Ptac启动子，此时A基因主要表达且可溶，B基因微量表达且可...	dkaif	2026-05-01 10:09
考研	生物学308分求调剂（一志愿华东师大）科研经历：生物方向：在生物学实验室参与内生真菌(p1)聚酮合成酶系功能解析：（1）运用snapgene完成pet28a-p1系列重组质粒的设计与模拟（2）以真菌cdna为模板通过高保真pcr扩增目的片段，经...	相信必会光芒万	2026-04-15 04:49
考研	生物学308分求调剂接受跨专业（一志愿华东师大）科研经历：生物方向：在生物学实验室参与内生真菌(p1)聚酮合成酶系功能解析：（1）运用snapgene完成pet28a-p1系列重组质粒的设计与模拟（2）以真菌cdna为模板通过高保真pcr扩增目的片段，经...	相信必会光芒万	2026-04-14 01:06
微生物	异源表达 pet-28a空载体转化到bl21（DE3）中会产生有活性的β半乳糖苷酶吗？我看文献中都是用的这个体系去表达自己的外源β半乳糖苷酶基因的，但是我试了一下我师妹的pet-28a载体含木聚糖酶基因转化...	无学论hh	2026-04-13 10:39
考研	男生，一志愿沪9生物学071000，初试308求调剂科研经历：生物方向：在生物学实验室参与内生真菌(p1)聚酮合成酶系功能解析：（1）运用snapgene完成pet28a-p1系列重组质粒的设计与模拟（2）以真菌cdna为模板通过高保真pcr扩增目的片段，经...	刘墨墨	2026-04-04 02:54
考研	男生，一志愿沪9生物学071000，初试308求调剂科研经历：生物方向：在生物学实验室参与内生真菌(p1)聚酮合成酶系功能解析：（1）运用snapgene完成pet28a-p1系列重组质粒的设计与模拟（2）以真菌cdna为模板通过高保真pcr扩增目的片段，经...	刘墨墨	2026-04-03 02:27
硕博家园	博一被送出联培感觉不适应怎么办然后我把pET28a换到BL21(DE3),又把自诱导换成IPTG诱导，这才有了表达。这浪费了很多时间，感觉他们不是很上心，但又一直催我。现在的状态就是早上9点钟多10分来，晚上出去一看都1点半了，...	全村的狗	2026-03-31 03:38
分子生物	蛋白表达两个基因，在基因组上是连到一起的（上一个基因的TAA最后一个A是下一个基因ATG中的A），将两个基因分别连接到pET-28a，都能表达，连接到pACYCDuet智力上的不同位点后就不表达了，这是为什么...	无难事	2024-12-18 01:29
分子生物	大肠双质粒发酵OD相差较大求助,大肠杆菌发酵时，转化了两株菌，一种是PACYCDuet质粒转化到BL21(DE3)，另外一种是PACYCDuet和PET28A双质粒共转到BL21(DE3）中，加入诱导剂后两株菌OD相差特别大，问下各位大佬是什么...	YYIN111	2024-12-03 07:46
分子生物	质粒共转化求助大家好，我使用pET-28a与pET-22b两个质粒分别携带一个目的基因，然后共转化进BL21，双抗进行筛眩然后一个菌落的菌p我做了两管，1管是pET-28a通用引物+28a质粒上目的基因下游引物，另外1管是...	无难事	2024-11-01 02:26
分子生物	重组菌株的表达求讲解，用pet28a（+）做载体构建重组质粒，然后测序出来后发现我的基因序列没克隆完全，还差30多个bp，用这个重组质粒去表达也没有表达出来，这跟我的目的基因下游引物没有终止子有关吗？...	柚子5114	2024-10-15 02:28
文献求助	重组大肠杆菌pET-28(a)/LF/BL21的传代稳定性重组大肠杆菌pET-28(a)/LF/BL21的传代稳定性李睿，王革，钱秋娟，王秉翔重组大肠杆菌pET-28(a)/LF/BL21的传代稳定性《微生物学免疫学进展》2012年第4期1-5,共5页	bio转录组	2024-07-03 02:02
生物科学	蛋白激酶胞内结构域原核表达纯化蛋白质出现在菌体沉淀中该怎么... 蛋白原核表达不出来，有没有什么办法？本人最近在做磷酸化实验，目前在纯化一个激酶，将kinasedomain（跨膜结构域已去除）的序列构建到GST载体...之前也用过pET-28a载体纯化，也是同样的情况。	fightingbj	2024-06-07 03:33
分子生物	原核表达诱导不出来，6月份还能诱导出来，同样的条件现在诱导不... 最近尝试表达纯化真菌的几丁质酶和丝氨酸蛋白酶（1200bp），使用pet28a作为载体、转到bl21(de3)里。6月底和师姐一起连接转化时表达出来蛋白，7月份用碧云天his标签纯化试剂盒没纯化出来。9...	出被窝	2023-11-02 04:13
硕博家园	大肠杆菌无法表达出外源基因最近做大肠杆菌表达外源基因(来源于细菌，密码子优化过)。pet-28a载体，测序全正确，但是诱导后没有检测到蛋白表达。这是什么原因呢	Zhaoqiong1	2023-10-20 10:18
硕博家园	请教如图，pet-28a载体启动子和RBS中间缺失一个碱基，会对阅读框有影响吗	Zhaoqiong1	2023-10-07 11:41
硕博家园	大肠杆菌克隆表达外源基因的大佬看过来最近做了几十个基因，利用pet-28a在大肠杆菌bl21中表达。几乎都是包涵体，绝大多数菌体破碎后仍浑浊。想请教几个问题1.破碎后菌体仍浑浊是因为包涵体的存在吗？还是因为菌体没被破碎开？...	Zhaoqiong1	2023-09-15 12:43
分子生物	大肠杆菌转化提质粒PCR有条带，酶切无条带 pet28a为载体，连接目的基因（为了对比做了两个公司的连接酶）导入大肠杆菌DH5α，挑取平板长的单菌落（平板抗性没问题），过夜摇菌提质粒，提的质粒做模板PCR验证和酶切验证，结果是PCR有...	食品考研！	2023-08-15 01:22
分子生物	关于大肠杆菌pet28a载体上限制性内切酶位点的选择想请教一下大家，BanmHI和Xhol共同工作时的酶切效率高吗...或者是在28a上哪两个内切酶共同酶切的效率比较高吗？希望能够得到回复，在蛋白表达这方面刚刚初入还是菜鸟级别，恳请大家的帮助求求	是辣辣	2023-08-13 12:13
分子生物	目的基因克隆进入pet28a载体是否在上游引物上要加ATG 找到的一个基因它的CDS开头不是ATG，是GUG，我想把这段基因CDS通过双酶切连到pet28a载体上，但是我又看到PET28a表达载体有起始密码子ATG和核糖体结合位点，把插入序列就能进行表达，请问我...	食品考研！	2023-07-24 12:13
分子生物	家人们有大肠杆菌蛋白表达载体pGEX-4T-1吗想通过置换获得这个表达载体，我们课题组载体有pET系列的28a、32a、42a，真核载体pAc5.1-V5/HisA、pAc5.1-V5/HisB、pMT/BIP/V5-HisA	a1370585309	2023-07-22 01:19
微生物	大肠杆菌在M9培养基中不生长从LB平板上挑的TOP10菌接到M9里面，死活就是不生长。有人遇到过这种情况么？是怎么解决的呢？Top10带我pet28a质粒	971731043	2023-05-18 12:54
导师招生	2023/2024博士微生物/食品发向学生自荐克罗诺坂崎杆菌crispr敲除体系建立共构建4个不同骨架的crispr敲除质粒，分别为puc19-espcas9、pbbr-espcas9、pet28a-espcas9和pb4t-espcas9，除puc19-espcas9（转化后无法正常表达espcas9...	feidi1142	2023-05-12 02:39