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大肠杆菌转化提质粒PCR有条带,酶切无条带 已有1人参与
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pet28a为载体,连接目的基因(为了对比做了两个公司的连接酶)导入大肠杆菌DH5α,挑取平板长的单菌落(平板抗性没问题),过夜摇菌提质粒,提的质粒做模板PCR验证和酶切验证,结果是PCR有目的条带,但是酶切几乎都没有目的条带,偶尔十分之一的概率可能会出现一个有目的条带的,请问这是咋回事呢(两个公司的酶做出来都是这样子的)? 是假阳性太多了吗,怎么避免呢?? |
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