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分类 共搜索到 27 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 基因敲除质粒的传代问题
大家好,哪位大侠能解释一下,不可复制的敲除质粒pK18mobsacB载体,转到大肠杆菌里面以后,是怎么扩增和传代的,它不是不可复制质粒吗?
bio-boy 2024-02-28 08:18
分子生物 pk18mobsacb基因敲除
同源重组基因敲除,单交换PCR验证两条带对吗?
S小金人 2023-10-23 03:59
硕博家园 pk18mobsacb基因敲除
最近在做谷氨酸棒状杆菌基因敲除,原始菌株是在之前做过敲除的同时敲入。目前敲除第一轮卡那筛选PCR验证得到了目的条带,验证引物设计在上下游同源臂,敲除后条带为800。...
利指导 2023-05-27 02:10
微生物 短乳杆菌基因敲除实验,求助pmad载体
现有PK18mobsacb载体做短乳杆菌基因敲除但是sacb对蔗糖敏感,所以不能用别人对短乳杆菌敲除成功的方法(电转化液和复苏培养基+蔗糖),需要求助别的载体,pmad载体,希望可以惠赠或者交换
wc卫成 2022-06-13 12:53
分子生物 求pDM4质粒或者pk18mobSacB
由于研究需要这两种质粒进行细菌基因敲除。希望道友们能共享或者交换一下。感激不荆
Ffffword 2021-11-24 02:05
微生物 无痕敲除抗生素失效
最近在用自杀质粒pk18mobsacb敲除红球菌的基因,在敲除一个目的基因后,再敲下一个基因的时候电转质粒后用卡娜霉素筛选的时候平板长出了大量菌落,挑取了一些菌落均为没有进行一轮同源交换...
caichenggu 2020-07-08 08:55
分子生物 pK18mobsacB
请问一下大家有谷氨酸棒杆菌pK18mobsacB质粒的图谱和序列信息吗?可以发一下吗?
Chen Lee 2019-07-05 11:16
分子生物 pK18mobSacB质粒求馈赠
最近实验要用到pK18mobSacB,哪位大神有这个质粒,可否惠赠一份?非常感谢!
凝胶电泳 2019-04-30 08:07
资源求助 哪位前辈有诱导型启动子植物表达载体,比如pER8或pTA7001、pTA...
如题,我手上有pHMI,pk18mobsacB,pA7-GFP,pEGAD,pCXSN-HA、MYC、FLAG、GFP系列植物表达,pGBT,pUC19-35S-FLAG-RBS,pGreenII0800-LUC,pGreenII62SK、pET-30a、1300-GFP、1301、...
赤月雪 2018-12-12 04:29
硕博家园 基因敲除,请教大神(pk18mobsacB
我想请教一下,将敲除的目的基因同质粒pk18mobsacB连接以后,转入到菌体中,需要经过两次筛选,第一次同源重组之后载体整合到菌体的基因组上,那敲除的片段还在不在呀,这个过程是怎么样的...
阿玲哒 2018-03-24 08:11
分子生物 基因敲除,请教大神(pk18mobsacB
我想请教一下,将敲除的目的基因同质粒pk18mobsacB连接以后,转入到菌体中,需要经过两次筛选,第一次同源重组之后载体整合到菌体的基因组上,那敲除的片段还在不在呀,这个过程是怎么样的...
阿玲哒 2018-03-24 07:20
微生物 请问有人用pk18mobsacB质粒敲除假单胞菌基因吗?
请问有人用pk18mobsacB质粒敲除假单胞菌基因吗?我用这个质粒敲假单胞菌基因都不长菌落,请问有人做过吗?
lijinky 2018-01-30 07:40
休闲灌水 有没有做基因敲除的前辈,能不能指导一下我的实验?
是这样的,我做基因敲除,设计了引物,左同源臂和右同源臂加起来1688bp,敲除后的基因送去测序是对的,双酶切后同双酶切的质粒pk18mobsacB相连接,之前害怕是酶切的问题,所以阳性阴性对照...
阿玲哒 2018-01-23 07:41
论文翻译 审稿人意见翻译不明白
审稿人的一条意见求翻译:ThesourceofpK18mobsacBisobscure.Tomyknowledge,thePuhlergrouphasgeneratedandpublishedthisplasmid.Itisalsoimpossibletofollowthe...
lbnno158 2016-04-13 10:07
微生物 基因敲除,sacB负筛选的问题
改造的pK18mobsacB质粒具有氯霉素和卡那抗性,受体菌具有利福平抗性,进行同源重组,得到单交换菌株(具有氯霉素、卡那和利福平抗性),但是单交换菌株在平板上划线,不知道为什么四区只长...
yaya0922 2016-03-27 12:30
分子生物 Red敲除,如何消除或降低假阳性
培养至OD=0.4~0.5,冰浴菌液30min,然后离心浓缩,预冷超纯水洗涤四次,预冷10%甘油洗涤四次,200μL10%甘油重悬,取100μL+1μg打靶片段(来自pk18mobsacB),2500V,200Ω,2.5μF,电击...
日光海 2015-09-29 01:41
分子生物 电转一次重组菌问题,请教大家
pk18mobsacB-△pgi质粒电转化进入谷氨酸棒杆菌中,在Km10平板上长出的一次重组菌都是谷氨酸棒杆菌,且没有杂菌,但是提基因组经PCR验证,没有出现△pgi大小的条带,而只有没有敲除的pgi条...
周志惠 2014-05-18 03:45
分子生物 遇到奇怪的现象,请教大家
pk18mobsacB-△pgi质粒电转化进入谷氨酸棒杆菌中,在Km10平板上长出的一次重组菌都是谷氨酸棒杆菌,且没有杂菌,但是提基因组经PCR验证,没有出现△pgi大小的条带,而只有没有敲除的pgi条...
周志惠 2014-05-16 10:01
微生物 S17大肠杆菌与假单胞菌的结合实验
我用的是pk18mobsacB质粒载体转化到S17大肠杆菌中去的,S17和pk18mobsacB质粒都不带有壮观霉素的抗性,可是得到的带有pk18mobsacB质粒的S17大肠杆菌就有了壮观抗性,这是哪出错了?
baidiliulian 2014-04-27 06:11
硕博家园 本人在做丁香假单胞菌的双交换,跪求E.coli S17-1菌株
大家好:我最近在做丁香假单胞菌的双交换,用的pK18mobsacB的自杀质粒,上下游片段取了400多bp。用的电击转化做单交换,再用10%蔗糖板子做双交换。可是分别划在KB和KB/kan的板子上的时候...
南木花园 2014-04-03 01:19
硕博家园 求助pK19mobsacB质粒,交换也可以啊
求助pK19mobsacB或pK18mobsacB质粒,也可以用其他质粒交换!
星空六小时 2013-09-25 03:32
生物科学 基因敲出求助!
基因敲除重组载体自杀质粒pKSV7,pMAD,pk18mobsacB,pKD46,pKD3,pKD13,pCP20,pUTminiTn5我初次做基因敲出,很多东西不明白,希望大家多多帮忙,我有几个问题希望大家能够给予帮助,十分感谢...
greendream52 2012-12-12 03:11
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