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分类 共搜索到 29 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
医学 科研干货|13种蛋白提取方法,赶快收藏手慢无!
4.按每1×106的细胞加50ulloadingbuffer加入2×loading;...置室温20min离心:7500g,5min,4度,弃上清吹干沉淀1%SDS溶解沉淀离心:10000g,10min,4度取上清-20度保存(或可直接用于WESTERNBLOT)存在...
科研虫子小助手 2024-07-17 02:10
医学 科研干货|13种蛋白提取方法,赶快收藏手慢无!
4.按每1×106的细胞加50ulloadingbuffer加入2×loading;...置室温20min离心:7500g,5min,4度,弃上清吹干沉淀1%SDS溶解沉淀离心:10000g,10min,4度取上清-20度保存(或可直接用于WESTERNBLOT)存在...
科研虫子小助手 2024-07-12 03:42
生物科学 科研干货|13种蛋白提取方法
5.按每1×106的细胞加50ulloadingbuffer加入2×loading;...20度保存(或可直接用于WESTERNBLOT)存在的问题:加入1%SDS后沉淀不溶解,还是很大的一块,4度离心后又多了白色沉淀,SDS结晶?...
MDL科研 2021-09-27 02:41
生物科学 13种蛋白提取方法,想要的都在这里!
按每1×106的细胞加50ulloadingbuffer加入2×loading;...20度保存(或可直接用于WESTERNBLOT)存在的问题:加入1%SDS后沉淀不溶解,还是很大的一块,4度离心后又多了白色沉淀,SDS结晶?...
MDL科研 2021-08-18 02:25
分子生物 ripa和2X SDS loading buffer哪个更好
最近在做westernblot。请问下面1)和2)哪种操作比较好。...1)用ripa裂解细胞后,上清加Loadingbuffer跑SDS-PAGE。2)直接往细胞上加2XSDSloadingbuffer煮了跑SDS-PAGE。
一个不小心就 2019-12-25 04:29
生物科学 组织蛋白里不小心加了SDS-PAGE Loading Buffer,没有煮放在-20里...
如题,提了组织蛋白,放在-20℃,某次做实验室不小心把SDS-PAGELoadingBuffer加到蛋白母液里了(加了几个才意识到,其他的没有加buffer),会不会影响蛋白的储存?还能用来做WB吗?蛋白一般...
一个人的格调 2017-08-20 01:12
生物科学 蛋白加了loading buffer,没煮,放-20℃会有什么影响吗?
如题,提了组织蛋白,放在-20℃,某次做实验室不小心把SDS-PAGELoadingBuffer加到蛋白母液里了(加了几个才意识到,其他的没有加buffer),会不会影响蛋白的储存?蛋白一般是怎么储存的呢?...
一个人的格调 2017-08-19 08:08
分子生物 SDS-PAGE 蛋白电泳酸性loading buffer
有人知道酸性的蛋白loadingbuffer是怎么配制吗?在线等,谢谢了
sgss1225 2017-05-25 02:03
硕博家园 蛋白点突变后在SDS-PAGE上位置变小了
我的SDS-PAGE中是加了巯基乙醇的loadingbuffer的如有大侠能解答我的疑问,感激涕零!160925Y纯化.jpg...
轻轻的微微 2016-10-11 01:11
生物科学 Southern blot技术资料分享
具体操作如下:在1.5ml离心管中依次加入DNA(1μg/μl)20μg10×酶切buffer4.0μl限制性内切酶(10U/μl...2.电泳:电泳样品中加入6×Loading缓冲液,混匀后上样,留一或两泳道加DNAMarker。...
e生物圈 2016-05-16 08:29
分子生物 SDS-page中loading buffer添加2-ME的影响
开始用有β-巯基乙醇的buffer,然后就跑出来一条带(如图2)。现在就是很好奇这是咋回事儿,二硫键?还望各位能指点一二(我的蛋白是大肠杆菌表达,收的包涵体的)图1.jpg图2.jpg
杜鹃羽 2016-03-11 12:55
职场人生 求助!关于SDS-PAGE试验中样品蛋白的处理问题
现在在做SDS-PAGE实验,想问一下蛋白样品在什么情况下需要稀释,具体又该如何稀释呢,还有2x,5x,6x的loadingbuffer又有什么区别,该怎么用?如果能举例说明就更好了,比如说当样品蛋白浓度...
宇文诗畅 2015-10-14 06:13
论文翻译求助完结子版 麻烦帮忙翻译一下题目,谢谢。
largeunilamellarvesiclefusionin10mMHepesbufferwithoutaddedsalt,whilethepresenceof...poly-L-lysinepre-treatedmicaweremeasuredatdifferentloadingrates.Inthe...
fgasxf 2015-01-21 08:18
分子生物 SDS loading buffer
我今天配的5×SDSloadingbuffer,加入DTT,1MTrisPH6.8,甘油之后是无色的,然后加入SDS后发现变成了很明显的粉色,难道DTT会因为PH值的改变发生颜色变化吗?理论上DTT和SDS溶液都该是没有...
cflikunlun 2013-10-31 08:14
分子生物 PCR loading buffer的问题
“10Xloadingbuffer中多了一样SDS,它会使酶类如taq酶变性,以PCR产物为例,在电泳泳道上会产生一片弥散,如果电泳跑的距离短,和多出来一条带没有什么区别(大概1000bp左右)。这句话啥...
duke188 2013-10-08 01:34
生物科学 关于蛋白电泳时loading buffer的配制
最近配制蛋白电泳的loadingbuffer,遇到了几个问题,还请前辈们指教:1、pH是配制Tris的时候调节还是...2、SDS溶解之后很容易凝,为什么?3、所有样品加入后,为什么需要过滤?过滤掉什么?
baobao包包 2012-12-10 12:48
分子生物 SDS-PAGE蛋白电泳同一蛋白不同loading buffer条带不一样
如题,我跑SDS-PAGE时,一个蛋白样品用商品化的SDS-PAGEloadingbuffer,煮沸5min后电泳条带大小为50kD左右,但是同一蛋白样品用NativePAGEloadingbuffer(即pH6.8的Tris-HCl和甘油配置)跑...
tzaixmc 2012-07-31 01:42
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