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分类 共搜索到 18 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 PLKO.1
PLKO.1载体转入DH5a是否可用蓝白斑筛选阳性克隆?
778zky 2022-08-28 10:08
医学 救救孩子吧
有做敲低细胞的吗,用plko.1质粒弄shRNA的。有些问题想请教。
柚子,会好的 2021-07-22 02:09
分子生物 shRNA loop选择 CTCGAG和TTCAAGAGA
CTCGAG为什么能行成loop呢,CTC和GAG不是互补吗,为什么它们...我用的是PLKO.1质粒,sigma给出的loop是CTCGAG,但是别人说,CTCGAG是回文序列,选择TTCAAGAGA效率会更高,到底用哪个好一些呢?
看文献学习 2020-02-27 08:08
分子生物 求助慢病毒载体pLKO.1 puro的生物安全性问题
本人新手,我想要在构建一个在哺乳动物细胞表达短链RNA的质粒,选择了U6启动子,外包公司含有U6启动子的载体就只有pLKO.1puro。通过查阅文献,这个质粒是含有完整顺式元件的HIV-1慢病毒质粒...
tjuwyn 2019-10-21 11:19
分子生物 质粒互换
求质粒pcDNA4/TO骨架载体,我有pLVTHMpLVCT-tTR-KRABpLKO.1-TRCcloningvectorpLKO.1-TRCcontrolTet-pLKO-neopsPAX2pMD2.GpGP-CMV-GCaMP6spGP-CMV-GCaMP6fCMV-G-GECO1.2CMV-NLS-R-GECOG-CaMP...
俺家卖灯 2019-06-06 01:15
生物科学 病毒转染HEPG2 细胞
首先,我用的是pLKO.1-TRCcloningvector.然后用六孔板种上HepG2,用不同的浓度puromycin去筛选细胞,得到致死所有细胞的最小浓度是3mg/ml.于是开始转染。但是开始出现问题了,1)转然24小时...
你是路人甲 2019-04-03 01:25
分子生物 shRNA序列茎环选择问题
本人要设计shRNA做慢病转染,sigma网站中已有序列间茎环用的CTCGAG(pLKO.1载体),我自己用的载体是pSicoR,那么文献中常用的茎环TCAAGAG、TTCAAGAGA或者直接用sigma网站中提供序列用的茎环...
aoyouying 2019-01-09 01:24
硕博家园 急求NCI-H1299和293T细胞,可给予适当报酬
因各种原因,现急求NCI-H1299和293T细胞,可用质粒plko.1交换,也可给予适当报酬以表感谢
小小仙人掌花 2018-11-09 03:25
分子生物 在构建RNA干扰载体中,目的片段与PLKO.1的连接问题
新人求教1、在合成我的干扰片段后(上海生工合成),发现目的片段的5`端是没有磷酸化的,而是羟基。因为在DNA连接时要形成3`-5`磷酸二酯键,这样目的片段和我的载体不是没有办法连接了?看...
胜哥的歌 2017-07-27 01:18
分子生物 哪位大神用过吉玛生物的慢病毒干扰载体
买一个怕自己设计的干扰效率不高,想从吉玛生物买一个设计好的载体,找技术支持问了下,发现他们的载体配合的是三个包装质粒的三代慢病毒系统,而我们实验室用的是PLKO.1载体跟PSPAX2和PMG2...
3030630048 2017-04-06 01:45
有奖问答 基因干涉
pLKO.1为载体干涉时的对照是什么,结构呢?求各位大神指教
雾雨思城 2016-12-22 02:53
专业外语 Chlorophila obscuripennis 这种甲壳虫的中文名是什么呢
obscuripennis(Coleoptera)Article?in?PhysicalReviewE77(1Pt1):012901·February2008ImpactFactor:2.29·DOI:10.1103/PhysRevE.77.012901·Source:PubMed论文来源
plko1996 2016-06-11 03:19
微生物 求助HT115(DE3)E.coli 以及 L4440质粒
求助HT115(DE3)E.coli以及L4440质粒,可以交换,我们实验室有pLKO.1病毒包装体系、pTet-on\off、pIRES、pmCherry-N1、pEGFP-C1、pET28系列等等,资源丰富,无法一一列举,如有交换需求的再...
mm3020 2016-05-11 06:03
生物科学 质粒酶切回收
PLKO.1质粒9000bp,双酶切出7000bp和2000bp的片段,跑电泳(1%琼脂糖)条带正确且清晰,回收质粒用的TIANGEN的,回收后测浓度和吸光值,D260/D280只有1.5甚至更低,操作很小心,好几次都...
Mandy 王曼曼 2016-05-05 01:21
分子生物 转进去PLKO.1载体的菌长得慢是怎么回事?
最近构建了PLKO.1的慢病毒shRNA载体,测序正确后转到DH5α中扩一下,不过长得超级慢,而且抽提出来的质粒也很少。虽然他们都说这个长得确实很慢,但是我的长得实在是太慢、太少了,这到底是...
白色帝企鹅 2015-01-02 04:02
分子生物 pLKO.1 shSCR质粒 的用途
在一篇文献中看到,使用pLKO.1shSCR质粒做对照,但不知道shSCR表示什么呢?请大伙指点指点!
aoda123 2014-10-23 11:12
分子生物 求助:质粒酶切问题,质粒被切飞了啊!
为什么我的AgeI酶切pLKO,1质粒载体每次切出来都是这个样子啊,求大侠们指点指点,严重影响实验进展了啊A=AgeIE=EcoRIAE=AgeI/EcoRI78=pLKO.1质粒。菜鸟新手上路,求高手们赐教啊!还有第三...
Lotus617 2014-05-11 04:15
分子生物 质粒构建出了奇怪的现象,实在找不到原因,请大家帮忙看看
我看到shRNA载体质粒plko.1mannual,上面说用EcoRI和AgeI分别酶切。并且AgeI是先切的,这是为什么,一定要按这顺序切吗?不可以一起双切吗?[Lasteditedbysr_913on2014-1-14at12:54]
sr_913 2014-01-13 08:23