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狮子美

铁虫 (正式写手)

[求助] PCR阴性跑出条带已有4人参与

做PCR时,做的阴性对照(未加模板)总是能跑出条带,换了酶,引物,水,枪头,PCR管,还是会出现。请问还应该考虑哪些因素,该如何解决?
PCR扩增的是细菌的16S
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

再找更阴性的对照试试,比如不放酶,NTP,引物。感觉还是有污染。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2022-01-08 19:41:24
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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)

看产物大小,可能扩增的是引物对二聚体

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2楼2022-01-08 13:49:23
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狮子美

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiao7270 at 2022-01-08 13:49:23
看产物大小,可能扩增的是引物对二聚体

产物和目标产物一样大

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3楼2022-01-08 14:25:31
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狮子美

铁虫 (正式写手)

1和2阴性对照,3和4目标产物
PCR阴性跑出条带



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4楼2022-01-08 14:26:24
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