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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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狮子美

铁虫 (正式写手)

[求助] PCR阴性跑出条带已有4人参与

做PCR时,做的阴性对照(未加模板)总是能跑出条带,换了酶,引物,水,枪头,PCR管,还是会出现。请问还应该考虑哪些因素,该如何解决?
PCR扩增的是细菌的16S
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狮子美

铁虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by xiao7270 at 2022-01-08 13:49:23
看产物大小,可能扩增的是引物对二聚体

产物和目标产物一样大

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3楼2022-01-08 14:25:31
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狮子美

铁虫 (正式写手)

1和2阴性对照,3和4目标产物
PCR阴性跑出条带



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4楼2022-01-08 14:26:24
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狮子美

铁虫 (正式写手)

送红花一朵
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5楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2022-01-08 19:41:24
再找更阴性的对照试试,比如不放酶,NTP,引物。感觉还是有污染。

我试试

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7楼2022-01-08 23:18:53
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狮子美

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2022-01-08 19:41:24
再找更阴性的对照试试,比如不放酶,NTP,引物。感觉还是有污染。

谢谢

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8楼2022-01-08 23:19:19
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狮子美

铁虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2022-01-08 19:58:00
试剂污染

全都换了新的,还是不太行

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9楼2022-01-08 23:19:54
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狮子美

铁虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2022-01-09 17:36:01
换其它牌子的试剂...

好的,我试试,谢谢

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12楼2022-01-09 23:08:22
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狮子美

铁虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by shuaibia6 at 2022-01-11 08:46:03
高浓度的东西很容易就污染环境了,所以你做扩增的房间就不要高浓度的东西了

谢谢

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18楼2022-01-13 23:20:42
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