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分类 共搜索到 45 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
医学 动物模型|荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
对lentiCRISPRv2进行XbaⅠ和BamHⅠ双酶切去除cas9表达框，酶切产物进行1%琼脂糖胶跑胶回收10000bp处条带，利用Addgene设计引物...ONEstepCloneKit(Vazyme)将lentiCRISPRv2胶回收产物和PCR产物...
 科研战神·王 2024-03-13 05:09
医学 荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
对lentiCRISPRv2进行XbaⅠ和BamHⅠ双酶切去除cas9表达框，酶切产物进行1%琼脂糖胶跑胶回收10000bp处条带，利用Addgene设计引物...ONEstepCloneKit(Vazyme)将lentiCRISPRv2胶回收产物和PCR产物...
 科研梦想 2023-01-11 08:52
生物科学 动物模型|荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
对lentiCRISPRv2进行XbaⅠ和BamHⅠ双酶切去除cas9表达框，酶切产物进行1%琼脂糖胶跑胶回收10000bp处条带，利用Addgene设计引物...ONEstepCloneKit(Vazyme)将lentiCRISPRv2胶回收产物和PCR产物...
 晚风12351 2023-01-11 06:45
动植物 【实验方法】一组实验告诉你，如何检测细胞污染
当存在支原体污染时通过PCR特异性扩增，会将目标DNA特异性的复制，然后通过琼脂糖电泳观检测，会跑出条带出现阳性结果，反之当没有...PCR无法扩增，则琼脂糖电泳跑不出条带，出现阴性结果...
 动物实验CRO 2022-04-24 07:24
分子生物 PCR阴性跑出条带
做PCR时，做的阴性对照（未加模板）总是能跑出条带，换了酶，引物，水，枪头，PCR管，还是会出现。请问还应该考虑哪些因素，该如何解决？PCR扩增的是细菌的16S
 狮子美 2022-01-08 02:10
生物科学 【实验外包】一组实验告诉你，如何检测细胞污染
当存在支原体污染时通过PCR特异性扩增，会将目标DNA特异性的复制，然后通过琼脂糖电泳观检测，会跑出条带出现阳性结果，反之当没有...PCR无法扩增，则琼脂糖电泳跑不出条带，出现阴性结果...
 MDL科研 2021-12-29 02:10
生物科学 【实验方法】如何检测细胞污染
当存在支原体污染时通过PCR特异性扩增，会将目标DNA特异性的复制，然后通过琼脂糖电泳观检测，会跑出条带出现阳性结果，反之当没有...PCR无法扩增，则琼脂糖电泳跑不出条带，出现阴性结果...
 MDL科研 2021-12-22 06:41
生物科学 一组实验告诉你，如何检测细胞污染-北京百奥思科生物分享
当存在支原体污染时通过PCR特异性扩增，会将目标DNA特异性的复制，然后通过琼脂糖电泳观检测，会跑出条带出现阳性结果，反之当没有...PCR无法扩增，则琼脂糖电泳跑不出条带，出现阴性结果...
 MDL科研 2021-08-13 03:49
硕博家园 跑不出目的条带，二聚体很亮
向各位大神求助，最近总是跑不出目的条带，引物二聚体特别亮，marker跑出来没有问题,这是什么原因呢我用的pcr体系10μL,引物各0...700，500，400，3000，5000ng/μL,泳道1是阴性对照，希望各位...
 微笑0692 2019-08-29 03:25
分子生物 PCR技术大攻略
6.使用阴性对照检查污染的发生。7.使用阳性对照（能良好扩增的样本）。8.电泳时使用dna分子量标准品（指示是否pcr失败或条带跑出凝胶或拍照系统失败）。9.当扩增很长的、gc含量高的模板时或...
 anfen2366 2019-06-14 09:48
转基因 【技术前沿】F类腺相关病毒载体介导的高效基因编辑技术
2个引物搭配扩增，若正确重组可以出~1.7kb条带，...2端的ITR很有可能会互补形成“snapback”结构而在电泳时跑的很快，若存在Rosa26-Luc包装AAVHSC15病毒载体双链，会通过SpeI酶切后经过...
 百奥赛图 2019-01-09 03:22
生物科学 实验被DNA污染了该怎么做
方法四：多年的经验是，只要认真注意，第一轮PCR（我做的是普通PCR需要开盖跑电泳）的污染基本可以避免。我比较奇怪的是，大家写到，...假阴性还好，可以优化条件出条带，污染了，往往难回头！
 LemnisCare 2018-11-20 08:42
生物科学 PCR
为什么PCRWT阴性对照和空白对照都跑出了条带呢忧伤
 Jiziyouji 2018-11-19 11:07
转基因 琼脂糖凝胶电泳
本人是做转基因动物鉴定的，这段时间pcr只能跑出突变条带，就是没有野生条带，就连做阴性对照的野生鼠也跑不出野生条带，合成了新的引物，也还是跑不出来，用的引物序列和程序跟之前的...
 飘弱 2018-11-06 01:20
分子生物 PCR知识知多少
引物用量过多，容易导致引物二聚体（电泳时位于前方不成条带的小片段）的出现。附：1.引物稀释...2设立适当的阳性对照和阴性对照，检测PCR各试剂的可用性及污染性，便于对电泳结果准确的分析。...
 华联科生物 2018-07-10 10:52
分子生物 【求助】连接转化大肠杆菌，菌落PCR跑不出条带
10ul连接体系），转化出的大肠杆菌一个板子只有不到20个菌落，挑单克隆做菌落PCR也看不到条带。后来又重新建立连接体系，载体量...连接产物单独拿出来做PCR是可以扩增出来目的条带的，现在就是...
 ffffang1234 2018-06-07 02:41
分子生物 PCR知识知多少
引物用量过多，容易导致引物二聚体（电泳时位于前方不成条带的小片段）的出现。附：1.引物稀释...2设立适当的阳性对照和阴性对照，检测PCR各试剂的可用性及污染性，便于对电泳结果准确的分析。...
 华联科生物 2018-05-30 08:42
分子生物 胶回收和PCR阴性对照污染问题咨询
1.在做一段长度2000bp的基因扩增的时候，发现阴性对照也能扩出条带，很亮而且明显与目标条带区分，是非目标条带的污染。...回收前跑出来的电泳是含不少杂带的，目标条带大小与非特异条带大小...
 quzhongzhi 2018-04-21 01:17
分子生物 HS高保真酶验证基因全长
因为要做真核表达，需要用保真性好一点的酶来获取质粒，我有四个基因，有两个跑PCR两三次就跑出条带，回收转化测序没毛病，但是...前期可以跑出目的条带，但连接转化菌液PCR时全是阴性的，做了...
 洛神惟惟 2017-12-14 03:06
有奖问答 菌液PCR一个泳道跑出四条带
菌液PCR一个泳道跑出四条带（最上面那一排），用的的是自身的特异性引物，阴性对照显示没有污染，下面其他的基因跑的好好的，不知道什么原因[eimg]2017/0718/bw133h5774263_1500361188_341....
 jqnb646 2017-07-18 06:54
分子生物 质粒重组一直做不出来啊，求大神分析一下原因啊，拜托啦！...
应该不是酶的问题）有时候当没做出克隆我会将没用来转化的液体跑胶看看连上了没，但是可以跑出来N多条带，除了能找到载体和目的基因的2条...60min，我之前其实是用soc摇的，但是实验室soc出了...
 帅气CKH 2017-07-10 02:00
生物科学 个人总结的琼脂糖凝胶电泳实验注意事项！
否则，你的试剂被污染了，到时候阴性对照狂出条带，再去找污染源很麻烦。而且配置体系时候要注意保持实验区的干净，事先可用小...如果你要第二天再跑胶，千万记得把PCR完毕的样本放入4℃保存。...
 z妲妲 2017-01-11 03:10
硕博家园 【最新】韩春雨回应方舟子的质疑
PCR产物直接回收最好不跑胶回收，可能跟ago切24bp有关，设好...银染分辨率高，可以排除T7E1假阳性，能做出预期条带后请用PCR产物去测序——–欢迎大家广泛使用此系统，并分享成功经验和失败...
 lfzliverpool 2016-07-05 12:13
分子生物 【求助】菌液Pcr 阳性率很低，载体双酶切后不彻底？
跑胶回收时，能看一条5Kb和一条750bp的条带。连接用的是neb的T4,10微升体系，16度过夜。目的片段的浓度是20纳克每微升，载体也是。两者摩尔比...我试着调了16个菌落做菌液pcr，但全部为阴性。...
 Doge Ku 2015-12-21 01:31
微生物 【交流/求助】有没有哪位大神曾经做过LAMP（环介导等温扩增）？...
经过RT后的cDNA直接用作阳性对照检测，打算建立体系，但发现定的两款引物（姑且称为引物一套、引物二套）在阴性和阳性对照的实验结果（跑胶条带）并无太大...（cDNA跑过pcr，有特异性条带；...
 stu杂食兽 2015-07-24 12:53
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