| 查看: 913 | 回复: 1 | ||
quzhongzhi新虫 (初入文坛)
|
[求助]
胶回收和PCR阴性对照污染问题咨询
|
|
1.在做一段长度2000bp的基因扩增的时候，发现阴性对照也能扩出条带，很亮而且明显与目标条带区分，是非目标条带的污染。后来重新做dd水灭菌，重新配引物，更换2X taq mix，枪头和PCR管也都是用新灭菌的，在做一遍，还是污染。但是做另一段2000bp基因扩增的时候阴性对照就没什么问题。 2.我对一段目的基因进行割胶回收，大小1900，回收前跑出来的电泳是含不少杂带的，目标条带大小与非特异条带大小至少有56百bp的区别，同时阴性对照没显示有问题。用回收产物在做PCR，在没有稀释回收产物的情况下，发现再次PCR仍然会有杂带，而且不是与目标片段接近的那种，是分的比较开的杂带。所以想问一下，这样的情况下我能否将回收产物送去测序。我的延生时间是2min，退火温度50度。 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有270人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
Tolypomycin
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1314.7
- 散金: 40
- 帖子: 265
- 在线: 53.3小时
- 虫号: 7240944
- 注册: 2017-09-28
- 专业: 生物化学
2楼2018-04-21 09:45:55
50