请问，我挑取单菌落进行菌落PCR，再跑胶能检测到明显的目标条带，将菌液测序，为什么公司说经活化，无法提取到合适的质粒，样品检测不合格呢？请各位帮我分析一下原因，谢谢

请问，我挑取单菌落进行菌落PCR，再跑胶能检测到明显的目标条带，将菌液测序，为什么公司说经活化，无法提取到合适的质粒，样品检测不合格呢？请各位帮我分析一下原因，谢谢

DNA浓度都在三千多，PCR用的DNA是稀释10倍的，扩增程序是下面的这个，PCR的浓度都在三百多，跑出的条带这样，这是污染还是降解啊

最后要跑胶回收，可不可以直接点样？因为目的片段在质粒上，不能pcr，只能酶切质粒，所以切20ug回收效率非常低目的片段6ng/ul（20ul左右），会影响之后的连接效率吗？如果想提高连接效率有...

但是载体还是蛮亮的，上个星期再重新摇菌提质粒做酶切，就没有东西了，胶上光秃秃什么都没有，单独跑质粒也是没有东西，但是拿质粒做pcr可以扩出目的片段，就差这最后一步了，好着急...

然后分温度梯度55.53.51.49（这组第2和第3个比较亮）图中点样顺序由右至左依次为PCR程序1.2.3.4，胶浓度2%，跑胶时间119v30min（实验室一直在用）附件：说明书案例只有点样孔亮，已用过但...

跑完核酸胶后条带成一大片，无法辨别是不是目的条带，已经减少PCR循环数和cDNA浓度，但是变化不大，目的条带大小是399bp，Marker旁边的是目的条带，没有成一大坨的是阴性对照。麻烦虫友们...

PCR跑出来以后，琼脂糖胶只有一个条带，如何可以克出来两个基因（两个基因长度大概都在960-980之间），除了用聚丙烯纤维胶。是不是要把所有的菌都挑了以后全部送测序才能测出这两个基因？...

Stratagene新的MycoSensorQPCRAssayKit通过实时定量PCR的方法来检测最低10个拷贝的支原体，连跑胶的时间都省了，整个过程只需要2小时。阳性PCR产物的Tm值为85C，而内对照为82C，通过熔解...

本人正在做几个质粒构建，从RNA提取反转录开始，都是从HPA查的RNA表达数据后挑选高表达的细胞系做的cDNA模板，在PCR产物跑胶后出现几个问题：第一个泳道和最后三个泳道都没有P出来，不确定...

我主要做老鼠尾DNA提取，跑了好几天PCR，都跑不出带来，我以为是引物有问题，...有的同学说可能DNA结合了蛋白，建议我加loadingbuffer之后在98度加热一下再跑胶，我也尝试了，也还是跑不出带。...

请教大家，做RT-PCR跑胶时，各组间有显著差异，但是qPCR时，各组相对表达值算下来只有0.0X和0.00X的样子，已经排除内参的问题，所以在考虑是否是引物设计的问题？或者是循环数太少？

个人情况：本科普通二本，熟悉作物遗传实验，pcr扩增，racepcr，跑胶等很熟练，毕设做的是抗逆基因。四级已过，完成一项大创，发表文章一篇，获得国励一次，四年常常待在实验室，做事勤恳。...

为什么我用碧云天试剂盒做genotyping，按照他的protocol，根本提取不出DNA，就算是按照工程师给我的回复，将消化延长至1h，仍然提取不出来，有没有遇到相同情况的朋友...PCR，跑胶等其它原因）

扩增后跑凝胶电泳，条带非常暗。应该如何解决？biostar2009

请教各位大神，我最近在做荧光定量PCR，基因是FOXA2，提取的RNA质量都很好，设计了好几对引物，溶解曲线都是乱的，产物跑胶验证也都没有条带，用高保真酶也p不出来，但是管家基因和其他几个...

最近做pcr，想将ABC三个片段连在一起，现在已经成功的讲AB和BC连在一起，最后一就是将AB和C或者BC和A连在一起。最后跑胶出来的结果最亮的条带总是C或者A的长度，ABC的长度较弱。也试过将ABC...

把含有目的基因的重组质粒通过SacI线性化后，电转化入GS115中，提取基因组，用AOX1引物PCR跑胶分析，听别人说应该出现两个条带，除目的基因条带外还有一个2.2Kb的条带，为什么会含有2.2Kb的...

打靶片段扩增出现错配（我没有测序，是PCR产物用Dpn1酶处理再跑胶切胶回收）3.是不是同源替换片段太长了，我打靶片段是1598bp，然后目的基因是699bp，会不会是太长了同源重组难以发生？4.我...

求助:请教各位大佬，我是研一实验室新手，做pcr跑胶时maker里有的条带没跑开，连在一起了，请教各位有什么原因会造成这种情况。

各位大神，请问荧光定量pcr溶解曲线正常，但扩增曲线出现图中的问题，是模板的问题吗？我提的rna浓度很高纯度不好，跑胶rna是正常的，第二张图是cDNA跑的胶。

引物、marker、PCR体系条件都是没问题的，1%的琼脂糖凝胶，100ml+5ulEB，跑胶用的新缓冲液。酚氯仿提DNA，操作规范没有污染。但是结果很奇怪，DNAmarker和阳性对照（左起第一第二个孔）条带...

最近在做基因敲除用引物跑上下游同源臂都能跑出来预计条带胶回收上下游同源臂后再以上臂正向引物和下臂反向引物做引物上下同源臂回收胶为模板跑pcr然后拖带很严重求教什么原因来个大佬

最近在做HPV25型的PCR-反向点杂交，做完PCR，跑胶是确定有条带的，但到杂交这一步，就只有显色质控点会显色，是什么原因，刚接触这一块，啥都不懂，求大神搭把手啊！

marker跑成这样是什么原因呀