24小时热门版块排行榜    

查看: 1410  |  回复: 4

张宏竹NJAU

新虫 (初入文坛)

[求助] 反转录后基因P不出来 已有2人参与

请教各位大神,我最近在做荧光定量PCR,基因是FOXA2,提取的RNA质量都很好,设计了好几对引物,溶解曲线都是乱的,产物跑胶验证也都没有条带,用高保真酶也p不出来,但是管家基因和其他几个基因都是正常的,恳请大神们帮帮忙,感激不尽

试剂:反转录用的是诺唯赞的P223(去除了基因组DNA),荧光定量用的是诺唯赞的P312,细胞是牛的原代肝脏细胞
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

狗狗狗尾巴草

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用细胞基因为模板能不能P出来?会不会是你设计的引物在内含子/外显子区域,真核生物反转录是不是内含子不表达?我不是做细胞的,只是建议您考虑下是否可能是这方面的原因
2楼2020-01-05 22:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (职业作家)

本帖仅楼主可见
3楼2020-01-05 22:46:50
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

Lillian李

新虫 (小有名气)

感觉还是takara反转靠谱点

发自小木虫Android客户端
4楼2020-05-20 22:13:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

等你的时候

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

可能是样本该目的基因不表达,  可考虑更换样本试试
5楼2020-05-21 23:19:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 张宏竹NJAU 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +6 纸鱼ly 2026-03-21 7/350 2026-03-23 19:06 by macy2011
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +10 手机用户 2026-03-17 11/550 2026-03-23 16:30 by lingjue
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +6 墨墨漠 2026-03-23 7/350 2026-03-23 16:09 by 墨墨漠
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +3 Promise-jyl 2026-03-23 3/150 2026-03-23 13:43 by wangkm
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
信息提示
请填处理意见