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反转录后基因P不出来
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张宏竹NJAU
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反转录后基因P不出来
已有2人参与
请教各位大神,我最近在做荧光定量PCR,基因是FOXA2,提取的RNA质量都很好,设计了好几对引物,溶解曲线都是乱的,产物跑胶验证也都没有条带,用高保真酶也p不出来,但是管家基因和其他几个基因都是正常的,恳请大神们帮帮忙,感激不尽
试剂:反转录用的是诺唯赞的P223(去除了基因组DNA),荧光定量用的是诺唯赞的P312,细胞是牛的原代肝脏细胞
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2020-01-05 17:30:24
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专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
用细胞基因为模板能不能P出来?会不会是你设计的引物在内含子/外显子区域,真核生物反转录是不是内含子不表达?我不是做细胞的,只是建议您考虑下是否可能是这方面的原因
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2楼
2020-01-05 22:12:44
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2020-01-05 22:46:50
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专业: 果树学
感觉还是takara反转靠谱点
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4楼
2020-05-20 22:13:17
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专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
可能是样本该目的基因不表达, 可考虑更换样本试试
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5楼
2020-05-21 23:19:22
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