帖子
显示全部
分类 共搜索到 135 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
文献求助完结子版 Gene splicing and mutagenesis by PCR-driven overlap ... 匿名 2014-12-25 09:09
硕博家园 overlap PCR,一直p不出啊,要疯掉了 跪求大神帮助,跪求啊
再以其为模板,做overlapPCR,反应条件是分为两步,第一步的退火温度是68循环10第二步退火温度是60循环30可是得到以下的电泳图像为什么会这样啊求大神指点啊跪求跪求[eimg]2014...
吕成敏 2014-11-18 08:21
硕博家园 overlap PCR问题求助
本人最近在做重叠PCR,将A片段950bp,B片段2114bp,C片段750bp组合成ABC片段。设计的引物A和B之间,B和C之间有25bp重叠。分别扩增A,B,C片段,后将A,B,C片段为模版,以A的上游引物和C的下游引物...
晗笑珊珊 2014-11-13 07:43
文献求助完结子版 Gene splicing and mutagenesis by PCR-driven overlap ... 匿名 2014-11-12 01:39
分子生物 overlap-pcr请教高人解答!谢谢!
大家好,最近从基因组中扩增片段为7800bp的片段,由于含有内含子,且RT-PCR获得这么大的片段太困难,故决定采用over-lap的方法从基因组中扩增。...但是做overlap的时候始终连接不上,用过全式...
czcpudai 2014-11-10 08:02
动植物 基因克隆
NCBI比对发现,我的目的基因是完全包含在另一个基因里面的,那个基因正好CDS区比我的目的基因多了中间这段,看有虫友说可以用overlapPCR技术进行重组,不知道还有没有其他有效的方法?...
846031273 2014-10-17 03:50
分子生物 转-载体构建的心得与体会
因为你PCR引物选的都在载体上,注意,引物必须分别在载体和插入片段上才准,PCR方法鉴定是极其准确的,我做过数百次菌液PCR,只要PCR条件正确,PCR和酶切结果绝对百分之百对得上。...
miclebibi 2014-08-18 05:38
文献求助完结子版 Insertion and deletion mutagenesis by overlap extension PCR 匿名 2014-07-17 01:47
分子生物 [已崩溃]RACE测序结果分析找不到GSP引物序列无从下手心酸头疼求...
3'第一轮和第二轮PCR都得到一条比较明亮的条带,大小约500bp...第二条比这两条要靠前(就是assemble后弹出的窗口中的线段比另外两个靠前),有一段90bp左右的overlap重复部分当然这些对比啊...
音四1990 2014-06-28 01:15
分子生物 质粒提取后跑电泳没有条带并出现拖尾
我的目的片段大小在3.5k,连的T载体,重组质粒大小应在6.5kb左右,之前转化到DH5a后做菌落PCR有目的条带,将菌接入LB摇瓶后提质粒浓度在200左右(4...T3-overlap质粒.jpg
beatrice1018 2014-05-06 05:51
分子生物 重叠延伸PCRoverlap extension PCR)的问题,头疼啊
各位大侠,本人最近在做重叠延伸PCR,想把三个基因连接起来,分别是1000bp,930bp,1000bp。三个片段通过PCR已经扩增出来了,条带很亮,并且做了胶回收,回收后的浓度分别是192ng/ul,307ng/...
带刀猎人 2014-04-20 08:27
分子生物 大家帮我看看我的overlap怎么回事?
140412-Vgb+P(5TUBE)-分段PCR副本.jpg2014413-PCR2全长副本.jpg
wncgliu86 2014-04-13 02:44
分子生物 诡异的overlap PCR实验现象,pcr后大片段消失了
第三轮overlapPCR将整个基因全长P出,整个基因两端引物TM值59度。试验结果是:前三轮反应都正常,可是overlapPCR就是死活P不出。为此,我将overlap反应的前后两段pcr产物克隆,送公司程序...
baibailiu 2014-04-11 09:13
分子生物 进行overlap pcr,结果不仅没有目的片段,跑胶的条带都比模板...
最近小弟正在做clone,想通过overlappcr把两组已经fusion过的基因(两个基因已经连接了)再连接在一起,pcr也采用了2步法,先将两个模板(每个2μl)(长度都在1.5kb左右)以60°c退火...
blodemaster 2014-03-10 08:12
分子生物 高通量测序领域常用名词解释(转)
以RNA结合蛋白的特异性抗体将RNA-蛋白质复合体沉淀之后,回收其中的RNA片段,经添加接头、RT-PCR等...什么是Contig拼接软件基于reads之间的overlap区,拼接获得的序列称为Contig(重叠群)。...
woody196 2013-12-23 06:14
科研资料 PCR技术盘点
重叠延伸PCR重叠延伸PCR技术(genesplicingbyoverlapextensionPCR,简称SOEPCR)由于采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将...
美亿美生物 2013-12-17 03:46
文献求助完结子版 Gene splicing and mutagenesis by PCR-driven overlap ... 匿名 2013-12-09 01:20
分子生物 OE-PCR与SOE-PCR有什么区别?
如题,overlappingPCR与重叠延伸PCR(splicingbyoverlapextension)的区别在哪里呢,我看着怎么差不多呢?如果做点饱和突变的话那个比较好一点?对应的筛选策略能有什么呀?求各位大神...
hathryn 2013-10-31 03:14
文献求助完结子版 Overlap Extension PCR:An Efficient Method for Transgene ... 匿名 2013-10-24 04:54
分子生物 overlap PCR
我最近在做overlapPCR,前后两段都已经P出来了,现在做连接,用了touchdown,温度从65℃降到45℃,但是依然没有条带,真不知道是什么出来问题,如果异物有问题,那前后两段也不能P出来吧!
LWL8798 2013-10-21 08:39
论文投稿 文章被据了。二个reviewer,一个可以,一个据。
analyzedfurther,forexampleq-PCR.5.TheproteomicapproachrevealedthatbothBacillusstrainsshow...anoverlapof11proteinsseemsquitesmall.Sincetheauthorsonlycompare...
zytbill 2013-09-26 08:05
论文翻译求助完结子版 300BB求助翻译一篇文献结果及摘要,一会追加200BB,求大神帮忙。
theresultofsequencingerrors.qrt-PCRAllindividualsfromallcolonieswerefoundtobeinfectedwithWolbachia.qrt-PCRshowedthatWSinvictaBwasdominantinall...
theSubtleAir 2013-06-26 11:07
分子生物 高悬赏求助实验设计
本人想做一个真菌基因敲除方面的实验,可以利用同源重组进行,最好利用OverlapextensionPCR进行,不知如何下手,急求交流应助~高分悬赏~:arm
xmckyltwx 2013-06-07 01:23
分子生物 请做过overlap pcr的大侠帮帮忙?
最近一直在做两个片段的overlap,但是一直扩不出目的条带,我的a片段870bp,b片段900bp,重叠在一起1700bp以上,但是每次我扩出来都是750bp左右有很亮的带,不知哪里出错了,恳请各位大侠帮忙...
zdx516 2013-04-12 01:59
分子生物 求“fusion PCR”原理
看文献的时候看到“fusionPCR”,不知道和“overlapPCR”是否一样,求前者的原理和具体做法。
annsp 2013-04-06 07:28