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【求助】如何测定多肽含量？
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| 我现在实验是做固态发酵，需要测定发酵前后多肽含量有无变化，想请问能测定么？怎么测？谢谢回答！ |
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 蛋白质贴 |
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sunday1325
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4楼2008-10-12 09:32:41
platto
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- 专业: 色谱分析
2楼2008-10-10 16:41:16
3楼2008-10-10 20:37:25
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样品中 蛋白肽的测定方法 1、原理 测定样品经三氯醋酸处理后上清液中蛋白质含量,既为样品中大豆蛋白肽的含量,也就是可溶性蛋白质(TCA)的含量。 2、试剂 所用试剂均用不含氨的蒸馏水配制。 2.1 10%三氯醋酸 其它试剂与《食品中蛋白质的测定方法》中2.1—2.6相同 3、仪器 定氮蒸馏装置 4、操作方法 4.1样品处理 4.1.1固体样品:精密称取2g左右固体样品用小烧杯溶解，并用玻璃棒搅拌，定容至100ml容量瓶中，取10ml注入比色管中，再加作入10ml 10%三氯醋酸，静止沉降30分钟后，过滤（或用离心机1万转离5分钟）取滤液（或上清液）5ml注入干燥的凯氏瓶中，加入2g催化剂及25ml混合酸，消化方法同蛋白质的测定方法相同 4.1.2样品：（如发酵液）经离心机1万转离5分钟吸取上清液10ml注入比色管中再加10ml 10%三氯醋酸，静止沉降30分钟后，过滤（或用离心机1万转离5分钟）取滤液（或上清液）5ml注入干燥凯氏瓶中，加2g催化剂及25ml混合酸进行消化。 4.2 蒸馏方法与蛋白质的测定方法相同。 4.3 计算 X=（V1－V2）×N×0.014×6.25×10/m×20/10×1/5×100/10×100 式中： X—样品中可溶性蛋白质含量，% ； V1—样品消耗硫酸或盐酸标准溶液体积，ml ； V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液体积，ml ； N—硫酸或盐酸标准溶液当量浓度 ； 0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数 ； 6.25—氮换算为蛋白质的系数。 [ Last edited by abcde420 on 2008-10-17 at 10:52 ] |
5楼2008-10-17 10:51:24
