24小时热门版块排行榜    

查看: 1552  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ojooo2

银虫 (初入文坛)

[求助] 条带偏大 已有1人参与

我的从NCBI上找的mRNA序列(1800bp)设计的引物,从植物里提取RNA(两个不同来源),RT,然后用得到的DNA跑PCR,但是无论怎么跑电泳条带都在接近2500的地方,如果降低温度,只要有条带,必有2500的这个条带,而且相对特别亮。touch down PCR的条带也在接近2500这个位置。温度降到42°后1800bp出现条带的时候tublin的对照组也有条带,而且特别特别淡。
麻烦大家指点下。
回复此楼
素描的世界
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by ojooo2 at 2016-02-09 22:58:51
谢谢您,我用的材料是从超市直接买来的香菜,我在blast里面找了,没有找到符合这个条带大小的序列...

毕竟基因库序列不见得是对的 所以有可能你手上的材料细胞实际序列不一样

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-02-10 00:24:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

引物的特异性 blast一下你这个引物在植物基因库里位置 另外考虑对产物测序 可能网上序列和你用的细胞系不一样

发自小木虫IOS客户端
2楼2016-02-09 04:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
ojooo2: 金币+60 2016-02-10 14:49:13
引物的特异性 blast一下你这个引物在植物基因库里位置 另外考虑对产物测序 可能网上序列和你用的细胞系不一样
3楼2016-02-09 17:00:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ojooo2

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fjtony163 at 2016-02-09 17:00:05
引物的特异性 blast一下你这个引物在植物基因库里位置 另外考虑对产物测序 可能网上序列和你用的细胞系不一样

谢谢您,我用的材料是从超市直接买来的香菜,我在blast里面找了,没有找到符合这个条带大小的序列
素描的世界
4楼2016-02-09 22:58:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +29 医学老男孩 2026-08-13 62/3100 2026-08-15 21:35 by 大快人心啦
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见