应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助
381/4返回列表1234下一页
查看: 2848  |  回复: 37
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

mwml用户名

新虫 (初入文坛)

[求助] 我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助 已有2人参与

引物之前跑能跑出来，程序也是之前试好了的。之前这个条带很好跑，结果也很清晰，但最近，它拖尾地都不能说是拖尾了，完全就是弥散。而且阴性对照不要太亮。试过换引物，换PCR仪，没大差，手上没留阳性对照。哪位能给分析下出现这种结果的可能原因？感激不尽。找不到原因我一直这么P下去，纯粹就是在浪费东西，根本就做不出来

我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助
marker左边是一直跑不出来的那个条带


我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助-1
以marker为边界，两份样品一起P的


我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助-2
左右两边重复试验


我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助-3
新旧引物对比，下面是旧引物


我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助-4
重新剪得脚趾，用的旧引物


我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助-5
不同引物、不同PCR仪


我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助-6
阴性对照出卖了我


我都快要疯了，九个样跑了快九遍了，真心求助-7
再次不甘心地用了别人在用的引物，结果就这样了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-01-22 21:22:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lizg8688

新虫 (初入文坛)
确保样品没降解，聚合酶没有失活

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2016-01-23 22:22:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

hollyhu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-23 22:44:12
mwml用户名: 金币+1 2016-02-18 15:45:14
弱弱的说一声是不是应该换一下酶，我们就准备了好几种酶，换着用，至少用DNA polymerase，Pfu等不同的酶进行扩增。
赞一下 回复此楼
2楼2016-01-23 21:25:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

川大太行

金虫 (正式写手)
模板的量是不是太多了？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
不惧不惑向阳而生
3楼2016-01-23 21:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)
模板和酶的问题

发自小木虫Android客户端
回复此楼
天空才是极限，我有信心飞的更高！
5楼2016-01-23 22:24:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

倩文默

新虫 (小有名气)
模板，引物会不会太多？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-01-23 22:49:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bright8

铁杆木虫 (著名写手)
模板的问题吧，重新换模板吧！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-01-23 23:18:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

家喻户晓

新虫 (小有名气)
很可能是模板问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-01-24 00:44:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuuyaoo
祝福

发自小木虫Android客户端
9楼2016-01-24 00:53:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mwml用户名

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lizg8688 at 2016-01-23 22:22:37
确保样品没降解，聚合酶没有失活

这两个都能确保，因为用同一个样品同一管酶扩增另一个片段是可以扩出来的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2016-01-24 09:05:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mwml用户名 的主题更新
381/4返回列表1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +4 a089 2026-08-07 4/200 2026-08-08 12:15 by arzu_hma
[找工作] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 10:39 by 3OOjAIS77qg2
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 4/200 2026-08-08 08:21 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭