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lzc112233

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助,HPLC基线噪声要把我逼疯了…… 已有5人参与

之前做的好好的,突然就变成了这个样子,1图是基线,2图是缩小后的样子,3图是走的甲醇样,我测的是四环素,流动相草酸:乙腈:甲醇=72:18:10。换仪器没用,换柱子没用,换甲醇乙腈没用,草酸重新配了4次还是没用,昨天管仪器的老师过来整了一个下午,还是没找出原因。气泡的话所有管道都排了5分钟以上,流动相也都超声过了……真的没办法了,求大神帮帮忙

求助,HPLC基线噪声要把我逼疯了……


求助,HPLC基线噪声要把我逼疯了……-1


求助,HPLC基线噪声要把我逼疯了……-2


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chunchun2013

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是灯能量不够,所以基线会变宽

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6楼2016-01-20 13:20:18
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
lzc112233: 金币+150, ★★★很有帮助 2016-01-20 18:26:52
我就稍微讲下思路,具体什么原因现在还不好确定。
1.换过色谱柱——不是色谱柱问题
2.换过仪器,且在这实验之后别的项目用这台仪器没问题——不是仪器问题
3.那考虑流动相和方法问题,四环素方法相对成熟,方法出问题的可能性不大,那么在配置流动相过程中唯一可能有问题的就是草酸溶液。
综上,你再仔细想想配置流动相过程中有没有什么纰漏?配好草酸溶液后有没有过滤?草酸溶液浓度0.01M/L,称量有没有出错?
以上~
铁甲依然在
12楼2016-01-20 14:49:36
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看见自己

铁杆木虫 (知名作家)

倒峰怎么回事,我是新手,不懂?

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3楼2016-01-20 12:59:38
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海角捕鱼

金虫 (正式写手)

倒峰是溶剂峰,溶剂中有水就会产生倒峰,建议测测灯能量,看看压力波动,再想解决的办法

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null
5楼2016-01-20 13:16:42
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的基线才0.001,不算太差呀。以前正常时基线有多高?

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11楼2016-01-20 14:21:06
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
da噪声跟设置有关系的,设置带宽和参比波长可以降低噪声的,另外等能量不问也会造成基线不稳
悲催的研发!
13楼2016-01-20 16:17:38
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ruan5058

铜虫 (正式写手)

亲,首先要确认是检测器本身引起的噪声 还是检测器意外的因素引起的,判断方法很简单,把输液泵关了,如果噪声还有,那就试检测器很问题,相反 你要找找看是那个部分引起的,一个个排除!

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14楼2016-01-20 16:46:15
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187071860

新虫 (初入文坛)

这个是死体积产生的峰,一般液相前都会有这个峰,方法不同,峰的大小也会不同

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15楼2016-01-20 17:10:25
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把斜率设置大点,积分结果就不是这样了。
16楼2016-01-20 17:13:26
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lzc112233

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2016-01-20 14:49:36
我就稍微讲下思路,具体什么原因现在还不好确定。
1.换过色谱柱——不是色谱柱问题
2.换过仪器,且在这实验之后别的项目用这台仪器没问题——不是仪器问题
3.那考虑流动相和方法问题,四环素方法相对成熟,方法出 ...

用乙腈:水的流动相走了个别人的样,然后奇迹地恢复了……已经没事啦,谢谢大家

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17楼2016-01-20 18:26:22
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忍冬1018

新虫 (小有名气)

换流动相之前,用乙腈水或甲醇水冲洗如果都正常的话,就是你的流动相混合脱气不好,脱气后多超声下,另外将最开始进流动相处的滤头超声十几分钟,这样再看看怎么样?另外看看有没有静电
19楼2016-01-21 13:19:45
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忍冬1018

新虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by lzc112233 at 2016-01-20 18:26:22
用乙腈:水的流动相走了个别人的样,然后奇迹地恢复了……已经没事啦,谢谢大家
...

以后注意吧。是每次换流动相前后没有将盐置换完全,以后多冲洗会吧
20楼2016-01-21 13:22:44
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lzc112233

铜虫 (初入文坛)

补一张以前走的标样……
求助,HPLC基线噪声要把我逼疯了……-3



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2楼2016-01-20 12:52:27
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lzc112233

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 看见自己 at 2016-01-20 12:59:38
倒峰怎么回事,我是新手,不懂?

方法自带的,没个图都会有……原理我也不懂

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4楼2016-01-20 13:13:07
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lzc112233

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 海角捕鱼 at 2016-01-20 13:16:42
倒峰是溶剂峰,溶剂中有水就会产生倒峰,建议测测灯能量,看看压力波动,再想解决的办法

不是仪器问题。其他人测样没事,泵压稳定

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7楼2016-01-20 13:20:56
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lzc112233

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by chunchun2013 at 2016-01-20 13:20:18
是不是灯能量不够,所以基线会变宽

其他人测样没事,拿着柱子和草酸去另一台仪器用还是这样

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8楼2016-01-20 13:21:47
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

草酸浓度多少?
铁甲依然在
9楼2016-01-20 13:35:50
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lzc112233

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2016-01-20 13:35:50
草酸浓度多少?

0.01mol/L

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10楼2016-01-20 13:42:37
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