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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩增产物跑8%的PAGE胶，带都是虚的，怎么办？
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乐乐male

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] PCR扩增产物跑8%的PAGE胶，带都是虚的，怎么办？ 已有5人参与

扩增片段是450，pcr程序为95 ℃    5 min
                                          95 ℃    30 min
                                          58 ℃    45 min
                                          72 ℃     45 min
                                             保温
点样是2uL，电压250，电流240



结果就是图上的那样，带特别虚，有拖尾，这是什么原因啊？求帮助

PCR扩增产物跑8%的PAGE胶，带都是虚的，怎么办？
RGZFU4{GA{2_NJ7Q8IR`2TE.png
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1楼 2016-01-19 16:10:50
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lifechuteng

版主

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【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 乐乐male at 2016-01-20 09:14:33
不是SSCP，
我是做基因精细定位的，这是SNP引物，因为片段太大了，我这都跑胶跑了快4个小时了，才跑了这么一点距离


跑的带太虚了，感觉带没有跑开！！！这是什么原因呢？...

8%的page分离范围不合适，450bp的条带应该不太能跑的动

丙烯酰胺(%)        有效分离范围(bp)        溴酚兰*        二甲苯青*
3.5        100～2000        100        460
5.0        80～500        65        260
8.0        60～400        45        160
12.0        40～200        30        70
15.0        25～150        15        60
20.0        10～100        12        45

你可以对应这个表看一下，我认为您需要浓度更小一点的胶
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8楼2016-01-20 09:51:08
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原海亮

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这是跑的什么胶额

发自小木虫Android客户端
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天空才是极限，我有信心飞的更高！
2楼2016-01-19 18:05:05
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匿名

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
本帖仅楼主可见
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3楼2016-01-19 19:15:31
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乐乐male

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
3楼: Originally posted by 青蛙快飞 at 2016-01-19 19:15:31
450琼脂糖就可以，为什么要用page?

我们这是SNP标记
赞一下 回复此楼
4楼2016-01-20 08:33:43
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