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紫萸香慢001

新虫 (小有名气)

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[交流] 求教求教:Taq酶作用？？？有没有人告诉我

Taq酶有没有逆转录酶的作用，比如我拿mRNA加入Taq酶，最终能合成cDNA吗。

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1楼 2016-01-16 21:01:53

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dadhz

铁虫 (初入文坛)

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楼主，看完你的描述，我的结论是，有百分之九十九可能性，你的mRNA中有DNA污染。
买个好一点的DNase I, 加到mRNA中，按照说明书指导的条件，彻底消化掉DNA，之后再扩增看看，还有没有条带。

至于taq酶有没有反转录活性，你如果有兴趣的话，可以换个其他的pcr高保真酶，替代掉taq酶，看看是不是仍旧能p出东西，依旧能扩增出条带的话，那是不是更加证明了DNA的污染？

补一句，你说的文献报道的taq酶的反转录活性，是在什么样的条件下？

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15楼2016-01-17 18:46:33

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dadhz

铁虫 (初入文坛)

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引用回帖:

17楼: Originally posted by 紫萸香慢001 at 2016-01-18 00:06:26
嗯嗯，谢谢你的热心解答，我看的文献只是提到Taq酶有反转录酶活性并未提及反应条件，请用你做的时候DNA酶是怎么使用的，我买了天根的和普洛麦格的试剂盒都不行啊

不知道lz目前做出来了没有

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23楼2016-01-28 21:36:26

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