| 查看: 1814 | 回复: 23 | |||
[交流]
PCR的结果没有目的片段，换过很多条件。求大神指导！ 已有14人参与
|
|||
第一次用高保真酶很顺利扩出来了大部分基因，可是后面用普通酶就扩不出来了 改变的条件就俩：1、高保真酶换成了普通酶；2、cDNA量加大了，从30ng左右加达到了300ng左右。 现在换了很多退火温度，都不行！条带都在marker最下面一条那。求帮助！！ 图是今天跑的，左边是引物、cDNA。右边是扩增产物。 图中分别是引物（<100）,cDNA（中间），PCR产物（<100）  1.png |
回复此楼» 猜你喜欢
伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预
已经有1人回复
-
西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有288人回复
-
金色抗生素单硫酸卡那霉素的物化性质、制备与前景
已经有0人回复
-
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
-
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析
已经有0人回复
-
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析
已经有1人回复
-
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展
已经有0人回复
-
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍
已经有0人回复
-
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner
已经有0人回复
lifechuteng
新虫 (小有名气)
- 应助: 62 (初中生)
- 金币: 504.5
- 红花: 12
- 帖子: 143
- 在线: 38.5小时
- 虫号: 3948241
- 注册: 2015-07-01
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2016-01-15 11:21:31
990104036
木虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 2103.6
- 散金: 710
- 红花: 2
- 帖子: 308
- 在线: 91.1小时
- 虫号: 1965302
- 注册: 2012-08-31
- 性别: MM
- 专业: 畜牧学
8楼2016-01-15 13:50:36
2楼2016-01-15 11:19:03
lifechuteng
新虫 (小有名气)
- 应助: 62 (初中生)
- 金币: 504.5
- 红花: 12
- 帖子: 143
- 在线: 38.5小时
- 虫号: 3948241
- 注册: 2015-07-01
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2016-01-15 11:23:26
ccqqsunshine
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 311.2
- 散金: 1656
- 红花: 6
- 帖子: 304
- 在线: 239.2小时
- 虫号: 436108
- 注册: 2007-08-25
- 专业: 果树学
5楼2016-01-15 11:28:56
6楼2016-01-15 12:41:51
7楼2016-01-15 12:43:18
9楼2016-01-15 16:18:36
jackyoung
新虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 3507.7
- 散金: 60
- 红花: 23
- 帖子: 670
- 在线: 91.7小时
- 虫号: 799178
- 注册: 2009-06-26
- 性别: GG
- 专业: 园艺学与植物营养学
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-15 22:29:48
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-15 22:29:48
|
估计是高GC吧，高保真酶一般对buffer 各种优化过，普通酶不行的话可以试着加入6%的DMSO，看看效果。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-01-15 19:59:30