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PCR的结果没有目的片段，换过很多条件。求大神指导！ 已有14人参与
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第一次用高保真酶很顺利扩出来了大部分基因，可是后面用普通酶就扩不出来了 改变的条件就俩：1、高保真酶换成了普通酶；2、cDNA量加大了，从30ng左右加达到了300ng左右。 现在换了很多退火温度，都不行！条带都在marker最下面一条那。求帮助！！ 图是今天跑的，左边是引物、cDNA。右边是扩增产物。 图中分别是引物（<100）,cDNA（中间），PCR产物（<100）  1.png |
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估计是高GC吧，高保真酶一般对buffer 各种优化过，普通酶不行的话可以试着加入6%的DMSO，看看效果。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-01-15 19:59:30