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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR的结果只有引物二聚体出来，目的片段没有。换过很多条件。求大神指导
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夏木鲁鲁

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by pengc201 at 2016-01-17 01:03:56
这个有太多的可能了。。
1. 模版浓度太低或者质量不好。(do a housekeeping gene positive control)
2. annealing temperature is not optimized, do a gradient PCR
3. are you sure the extension time is en ...

其实有很多方面我确实不确定。我们目的片段查了文献232bp。反应条件老师给的，没出来结果才想的优化。另，实验室条件不太好，梯度pcr只能一遍一遍的做(ಥ_ಥ。我还有很多方面要学，最后，多谢给我建议。
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21楼2016-01-21 11:59:09
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夏木鲁鲁

新虫 (初入文坛)
???????:
10?: Originally posted by ????2010 at 2016-01-14 14:41:36
??actin?????壬??????????????????????????????????????1-2ul??56??????????????????о????????????

总之。多谢建议，我会好好加油的
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22楼2016-01-21 12:02:30
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夏木鲁鲁

新虫 (初入文坛)
???????:
4?: Originally posted by ????????? at 2016-01-13 19:51:12
????????????????????56??55??54??53??52

??过了，没有什么用，???能也有其他方???问题。我??看看
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23楼2016-01-21 12:06:56
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夏木鲁鲁

新虫 (初入文坛)
???????:
22?: Originally posted by ????? at 2016-01-21 12:02:30
总之。多谢建议，我会好好加油的...

?????????=_=????????????????????????????????л???

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
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24楼2016-01-21 12:10:21
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夏木鲁鲁

新虫 (初入文坛)
???????:
23?: Originally posted by ????? at 2016-01-21 12:06:56
??过了，没有什么用，???能也有其他方???问题。我??看看...

??温试过一点。??过我还得??新开始试

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
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25楼2016-01-21 12:11:20
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夏木鲁鲁

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
多谢，我明年重新做的话，会请教您的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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26楼2016-01-21 12:13:49
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夏木鲁鲁

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by ss2032 at 2016-01-14 14:52:09
一般不是做30个循环么？？？...

我不确定哪个是一般，条件的话我再看看，需要跟老师商量一下，明年再继续

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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27楼2016-01-21 12:18:21
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蝶~恋花

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chiemo at 2016-01-14 10:48:41
你怎么判定是引物二聚体的？是否因为合成的引物不纯？可以试试touchdown PCR，我之前跑出来有杂带，touchdown后就只有目标序列了

你好！求助怎么做touchdown PCR？急求！
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28楼2016-10-08 16:13:15
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阳光拐角处

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

lz做成功了吗？实验室遇到同样的问题，怎么做也P不到目的基因，只有很亮的二聚体
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29楼2016-12-05 14:36:04
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