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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于宝生物xho1酶的连接问题
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wj2423311236

银虫 (小有名气)

[求助] 关于宝生物xho1酶的连接问题 已有2人参与

最近在做双酶切后的连接，连续两次了做不出来，使用的酶是bamh1和xho1，其中xho1的说明书上说要用平末端的连接条件，可是bamh1却又要求黏末端的连接条件。现在很纠结到底用那个条件。还有平末端的连接条件是什么？新手表示很困扰啊。用的酶是宝生物的，载体是pet28a。
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1楼 2016-01-13 17:29:04
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犹怜草木青

木虫 (职业作家)

热心群众铁柱儿
这种克隆方式已经属于旧技术了，你可以试试同源重组的方式连接。对酶切位点没有要求，对片段也没有要求。能一次重组上去多个片段。
只需要设计引物的时候价格同源臂就行了。
现在这是最方便的技术了。有兴趣的话自己就去找找相关技术视频看看。
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铁柱儿是个温柔的姐姐
10楼2020-12-31 18:18:58
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gnice

金虫 (正式写手)
做过很多，常规条件就行。很好连

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2楼2016-01-13 18:03:24
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wj2423311236

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gnice at 2016-01-13 18:03:24
做过很多，常规条件就行。很好连

可是我两次都没做出来啊

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-01-13 18:19:06
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wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是要看下酶切可有问题，一般连接很少出问题
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4楼2016-01-13 18:51:48
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普通表情 龙 兔 虎 猫
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