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[交流]
mix可以扩出来的Taq酶扩不出来 已有4人参与
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最近用特异性引物做PCR检测，结果发现同样的PCR条件，同样的模板和引物， 用擎科的2×MIX（蓝色的）能扩出来目的大小的条带，但是同时阴性对照（水做模板）也在目的大小处有弱弱的条带(已经换过新的mix)。 用takara的rTaq酶,却啥都扩不出来了，阳性对照也没条带，用Taq降低了退火温度又发现杂带很多。 大神们，这样的情况该如何解决，让阴性扩不出来阳性扩得出来且没有杂带~~~~ |
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石磊1234vera
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7楼2016-01-12 23:04:37
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The specific primers might contaminant DNA template in traces. Therefore, you should use fresh primers. You can use touchdown PCR for increased specificity and sensitivity in PCR amplificaiton.  |
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2016-01-12 09:21:50, 181.55 K
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txing
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4楼2016-01-12 21:23:06
